真菌M95.33 β-木糖苷酶基因克隆表达及催化10-去乙酰紫杉醇木糖苷为10-去乙酰紫杉醇的研究
基本信息
批准号：30770229
项目类别：面上项目
资助金额：30.00
负责人：朱平
学科分类：
依托单位：中国医学科学院
批准年份：2007
结题年份：2010
起止时间：2008-01-01 - 2010-12-31
项目状态： 已结题
项目参与者：胡晨曦,刘文超,李长清,何慧霞,王迷娟,朱慧新,肖薇,杜会霞
关键词：
β木糖苷酶重组酶催化紫杉醇木糖苷10去乙酰紫杉醇基因克隆
结项摘要
针对红豆杉植物中紫杉醇天然含量很低、而原料中多达10倍以上的10-去乙酰紫杉醇木糖苷(XDT)一般无法利用的状况，根据已发表的几种真菌β-木糖苷酶基因保守区设计并合成若干组上、下游引物，以一株可将XDT转化成10-去乙酰紫杉醇(DT)、但生长较慢的真菌M95.33为材料，提取基因组DNA并以其为模板进行PCR扩增和扩增片段的TA克隆与测序，筛选可能的β-木糖苷酶基因片段。提取该真菌总RNA，根据上述DNA信息用SMART技术获得β-木糖苷酶基因全长序列，将该基因克隆到酵母表达载体pPIC9K，导入生长快、具外泌性的毕赤酵母，获取重组酶。以XDT为底物，研究用重组酶催化而高效率获取DT，为化学半合成紫杉醇提供充足原料。其重要意义在于：从上述真菌中获得该基因具首创性，可丰富GenBank内容并有望申请该基因及其用途的国家和国际专利；该方法可有效提高红豆杉资源利用率，缓解紫杉醇供求矛盾且环境友好
项目摘要
项目成果
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数据更新时间：2023-05-31
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