苗药黑骨藤配伍金铁锁抗类风湿关节炎的物质基础及机制研究

黑骨藤和金铁锁均为贵州十大苗药之一，临床上常配伍治疗类风湿性关节炎（RA），疗效确切。方中黑骨藤长于祛风除湿止痛，金铁锁长于散瘀止痛祛风，两药相须配伍共奏祛风散瘀止痛之效。为进一步提高RA的治疗效果，探索其有效物质基础以及作用机制。课题组将黑骨藤和金铁锁药材配伍经系统溶剂法获得氯仿部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位及水液部位经组间配伍，以药物抗RA动物模型为评价手段优选出最佳的极性部位配伍组合；运用植物化学手段从最佳的极性部位配伍组合分离获得总皂苷和总生物碱并进行组间配伍及若干单一化合物并进行结构鉴定，以文献研究为基础选出4-5个化合物再进行组间配伍，以药物抗RA动物模型为评价手段优选出最佳的有效部位配伍组合和最佳的有效成分配伍组合；继而采用药效综合验证实验评价黑骨藤与金铁锁药材配伍、极性部位配伍、有效部位配伍和有效成分配伍并优选出最佳配伍组合；最后采用蛋白组学等技术探索其分子层面的作用机制。

黑骨藤和金铁锁均为贵州十大苗药之一，临床上常配伍治疗类风湿性关节炎（RA），疗效确切。方中黑骨藤长于祛风湿止痛，金铁锁长于散瘀止痛祛风，两药相须配伍共奏祛风散瘀止痛之效。为进一步提高RA的治疗效果，探索其有效物质基础以及作用机制。课题组将黑骨藤和金铁锁配伍经系统溶剂法获得氯仿部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位以及水液部位经组间配伍，以药物抗RA动物模型为评价手段优选出最佳的极性部位配伍组合；运用植物化学手段从最佳的极性部位配伍组合分离获得总皂苷和总生物碱并进行逐渐配伍及若干单一化合物并进行结构鉴定，以文献研究为基础选出4-5个化合物在进行组间配伍，以药物抗RA动物模型为评价手段优选出最佳的有效部位配伍组合和最佳有效成分配伍组合；继而采用药效综合验证实验评价黑骨藤与金铁锁药材配伍配伍、极性部位配伍、有效部位配伍合有效成分配伍并优选出最佳配伍组合；最后采用蛋白组学等技术探索其分子层面的作用机制。.经过研究，项目组已建立了药物抗RA动物模型，确定了科学先进的检测指标。用药物抗RA动物模型验证四种极性部位配伍组合，优选出最佳极性部位配伍。最佳极性部位经系统预实验，鉴别其所含成分类别；根据最佳极性部位系统预实验结果，通过文献筛选各成分的主要药理作用，最终选择具有抗炎、镇痛等药理作用的有效成分。.采用液液萃取的手段将最佳极性部位中具有抗炎、镇痛的有效总类成分分离，得到的有效总类成分利用药物抗RA动物模型验证，初步优选出最佳有效部位配伍组合。初步优选出的最佳有效部位组合粗提物通过大孔吸附树脂，分别分离得到总皂苷和总黄酮类成分，运用紫外-可见光分光光度法建立总皂苷和总黄酮的含量测定方法并进行方法学考察，测定总皂苷和总黄酮在浸膏中的含量。将总皂苷、总黄酮、总皂苷+总黄酮三个部位以药物抗RA动物模型验证，优选出最佳有效部位配伍组合。将抗类风湿性关节炎的最佳有效部位配伍组合通过硅胶柱色谱法，分离得到一系列化合物，目前分离得到的化合物正处于鉴别阶段。.项目组对苗族医药治疗类风湿性关节炎的调查研究，利用高效液相色谱法对贵州不同产地苗药黑骨藤的质量分析。利用高效液相色谱法结合紫外-可见光分光光度法，对黑骨藤配伍金铁锁提取物的含量测定方法。项目组还对黑骨藤配伍金铁锁的提取、分离、浓缩、干燥、成型工艺进行了研究。申请了六类新药黑金胶囊的国内专利，对该胶囊的质量标准研究与制定。