BAG3与MACC1相互作用在甲状腺癌细胞上皮间质转化(EMT) 及侵袭中的作用

Currently we reported that cochaperone BAG3 and phosphorylation of BAG3 has the new function of regulating epithelial-mesenchymal transition(EMT) of thyroid cancer cells, but the mechanisms remain largely unclarified. MACC1 is a novel gene identified in 2009, which plays a critical role in the regulation of HGF/c-MET signal transduction as a coactivator of c-MET. Moreover, MACC1 is reported to play an important role in EMT and invasion of cancer cells. In our preliminary work, for the first time, we identified MACC1 is the new protein which can directly interacts with BAG3. Based on our previous data, the current project aims to identify the interaction domain between BAG3 and MACC1, clarify the role of MACC1 in BAG3 regulating EMT, motility, migration, as well as invasion of thyroid cancer cells，furthermore study the impact of BAG3 phoshorylation on chromatin structure of MACC1 target gene c-MET, at the same time detect the co-expression of BAG3, MACC1, c-MET in clinical thyroid carcinoma and clinical significance. Our research will promote us to fully understand the role of BAG3 in the development of tumor.

最近我们报道了共分子伴侣BAG3及其磷酸化具有调控甲状腺癌细胞上皮间质转化（Epithelial-mesenchymal transition，EMT）的新功能，但作用机制尚未阐明。MACC1是2009年新鉴定的c-MET共激活因子，在肝细胞生长因子/受体（HGF/c-MET）信号转导中发挥关键调节作用，调控上皮性肿瘤EMT和肿瘤细胞迁移、侵袭。前期工作中我们鉴定出MACC1是BAG3尚未报道的直接相互作用蛋白。本项目拟在此基础上鉴定BAG3与MACC1的相互作用结构域，阐明MACC1在BAG3调控甲状腺癌细胞EMT、运动、迁移及侵袭中的作用，并研究BAG3磷酸化对MACC1所调节靶基因c-MET染色质结构的影响，同时检测BAG3、MACC1、c-MET在临床甲状腺癌组织中的共表达及临床意义。该研究将推动我们进一步充分认识BAG3在肿瘤发生发展中的作用。

Bcl-2相关抗凋亡基因3（Bcl-2-associated athanogene 3，BAG3）是BAG家族的重要成员，BAG3蛋白在进化上高度保守，主要分布于胞浆中。 BAG3蛋白参与调节不同的生物过程，例如细胞凋亡，细胞重构和自噬，研究已经确定了BAG3蛋白通过磷酸化ERK通路诱导内皮细胞血管重构和肿瘤生成。此外BAG3蛋白参与肿瘤细胞增殖、粘附、迁移、侵袭以及上皮-间质转化等。结肠癌是世界上最常见的消化道恶性肿瘤，也是我国常见的恶性肿瘤之一。近年来，结肠癌发病率呈上升趋势，死亡率比较高。然而BAG3蛋白在结肠癌发生发展过程中的作用尚不清楚，本实验通过检测BAG3蛋白在结肠癌临床样本中的表达情况，探讨BAG3蛋白与结肠癌发生发展的关系。然后干预BAG3表达，研究其对结肠癌HCT-116细胞生物学功能的影响，探讨其与结肠癌发生的相互关系。旨在为进一步寻找结肠癌相关药物靶点，开发新的肿瘤治疗药物提供理论基础。实验结果显示：BAG3蛋白在结肠癌临床样本癌组织中的表达高于在癌旁组织中的表达，同时BAG3蛋白的表达与临床病理学参数具有一定的相关性，在结肠癌HCT-116细胞中，过表达BAG3促进细胞增殖、增强细胞的迁移、侵袭能力，敲除BAG3后抑制了细胞增殖、抑制了细胞迁移、侵袭能力。同时发现，BAG3蛋白的过表达与结肠癌细胞对抗肿瘤药物5-FU的敏感性有关。通过基因芯片和生物信息学分析发现BAG3蛋白对结肠癌细胞生物学行为的影响，与多条信号通路具有相关性，形成了复杂的信息调控网络。