双向电泳分析水牛卵母细胞及卵泡液中蛋白质的研究

本课题利用蛋白质组学手段研究水牛卵母细胞及卵泡液中蛋白质的变化，建立高丰度的双向电泳图谱，通过比较蛋白质组学筛查成熟前后卵母细胞阶段性表达的若干个差异蛋白质，利用基质辅助激光解离飞行时间质谱（MALDI-TOF）测定质量指纹图谱。对数据库已知蛋白，采用实时荧光定量PCR检测其基因水平和蛋白水平表达量的相关性；对未能匹配的新蛋白质进行N端测序，并初步研究其功能。比较优势卵泡和普通卵泡中卵泡液的蛋白质组分，筛选影响卵母细胞生长发育的调控因子或成熟标志物。本项目将建立卵母细胞蛋白质组学研究技术体系。构建差异蛋白质数据库。致力于发现与卵母细胞成熟相关的关键蛋白。更加全面真实的揭示生殖细胞的发育机理，为提高水牛繁殖效率，加速奶水牛品种改良打下理论基础。在此基础上，探讨蛋白质变化与培养体系的关系，为水牛卵母细胞体外培养体系的进一步优化提供依据。