miR-452诱导EMT及促进结直肠癌侵袭和转移的分子机制

microRNA array detect 200 paired colorectal cancer tissues found that miR - 452 is significantly higher in the cancer tissue. Compared with low transfer potential colorectal cancer cell lines, miR - 452 is highly expressed in high transfer potential colorectal cancer cell lines, suggests miR-452 has the close relationship with metastasis of colorectal cancer; Biological informatics software pedicted that miR - 452 could be target with DACT1protein , activate the Wnt signaling pathways, promote the EMT .But the molecular mechanism remains to be unclear. Our research will overexpresse or knocked out miR-452 in colorectal cancer cell lines. Adopt cell function experiments and integrated visualization assays to observe the action of miR-452 in activating Wnt pathway and inducing EMT . Reveal the possible mechanism of miR452 in promoting the invasion and metastasis of colorectal cancer. Ultimately provide new targets for treatment of colorectal cancer..

利用microRNA芯片检测200对结直肠癌配对组织发现miR-452在癌组织中的表达显著高于正常组织，同时，与低转移潜能结直肠癌细胞株相比，miR-452在高转移潜能结直肠癌细胞株中表达较高，提示我们miR-452与结直肠早期转移密切相关；生物学信息学软件预测发现miR-452可以靶向作用与DACT1蛋白(β-catenin的拮抗蛋白)，进而激活Wnt信号通路，诱导EMT发生，但其具体分子机制尚待阐明。本研究将以稳定过表达和干扰miR-452b的细胞株为模型，通过细胞学实验、分子生物学实验及整体可视化结直肠癌动物模型观察等方法，在体内、外确定miR-452b激活Wnt通路、促进EMT及结直肠癌细胞侵袭和转移的功能；揭示miR-452在结直肠癌侵袭转移中的作用机制，为结直肠癌转移治疗及药物筛选提供新靶标。

结直肠癌（Colorectal Cancer，CRC）是全球高发的恶性肿瘤之一，严重威胁着人类生命健康，因此，预测患者远处转移的风险、探讨结直肠癌发生转移的分子机制，对于判断预后及指导综合治疗的实施具有重要意义。结直肠癌发生与发展是一个多基因参与、多因素相互作用、经过多个阶段最终形成的、极其复杂的生物学现象。越来越多的研究发现microRNA参与结直肠癌的发生发展，其中一些microRNA在结直肠癌中的作用已得到了证实。我们在43例配对结直肠癌组织中检测时，发现microRNA-452在癌组织中的表达显著高于对照组，且miR-452的表达与患者的TNM分期、生存预后密切相关；我们还发现miR-452可以促进结直肠癌细胞的增殖及侵袭能力；通过生物信息学的分析，我们发现miR-452可以通过结合GSK3β而激活WNT/β-catenin信号通路，进而上调其下游靶基因MMP7、C-myc、CyclinD1的表达，最终促进肿瘤细胞的增殖及侵袭；同时，我们发现WNT/β-catenin信号通路激活后，其转录因子LEF1/TCF4可以上调miR-452的启动子活性，促进miR-452的表达，最终，miR-452、GSK3b、WNT/β-catenin、LEF1/TCF4四者形成一条正反馈环路，促进结直肠癌细胞的生长及转移能力。本研究一方面阐明了miR-452促进结直肠发生发展、侵袭转移的现象及其作用机制，另一方面发现了miR-452与患者临床分期及生存预后的关系，以期miR-452可成为结直肠癌发生转移的诊断预后标志物。