耐受性树突状细胞在变应性鼻炎过敏与耐受模型中的机制研究

Allergic rhinitis (AR) is a popular chronic disease of the nose. Allergy and tolerance are two reactions when the body exposes to allergen. In our previous study, we establish a natural AR model through nostril instillation with pure ovalbumin of different concentration. We then study the immune tolerance and allergic memory with the AR model. Close relationship between the allergen concentration and allergy or immune tolerance is found. Meanwhile, we find different differentiation of the dendritic cells (DCs) may occur with the OVA stimulation of different concentration in vitro, which influence the immune direction of downstream T cells. In current study, we plan to explore the mechanism of DC, especial tolerant DC (tolDC) when stimulated by allergen of different concentration or period. We expect to find the key factors between the allergen concentration and immune tolerance. Meanwhile, we plan to explore the mechanism of tolDC during the course of immune tolerance attenuation, and the methods to maintain the tolerance. An allergen specific tolerance DC will be established, which is used to eliminate the specific allergic memory. The current study will afford practical evidence for AR prevention and treatment which is closed to the natural course of the disease.

变应性鼻炎(AR)是临床常见鼻部慢性疾病。过敏与耐受是机体暴露于变应原后的两种反应状态。在前期研究中，我们应用不同浓度无佐剂卵清蛋白(OVA)滴鼻，建立了尽可能贴近自然致病过程的小鼠AR模型。在此基础上，进行了AR免疫耐受及过敏记忆观察。发现变应原浓度与过敏状态及程度、免疫耐受及其衰减有密切关系。同时，我们还发现不同浓度变应原体外刺激树突状细胞(DC)，可使DC出现不同分化状态，进而影响下游T细胞分化方向。在本项目中，我们拟对DC尤其是耐受性DC在不同浓度-时间变应原刺激下，所形成的过敏-耐受相关机制作较深入研究。期望找到变应原浓度与耐受形成之间的关键因素。同时将对耐受性DC在免疫耐受衰减中的相关机制，及其状态维持进行探索。然后通过构建变应原特异性耐受性DC细胞，对过敏免疫记忆消减进行研究。本研究可望为临床AR预防及治疗提供尽可能贴近自然的参考结果，具有极好的应用价值。

过敏性鼻炎是常见的鼻部过敏性炎症性疾病，其发病率达到正常人群的10%～25%，且其发病率呈不断上升趋势。在过敏性鼻炎的实验研究中，C57BL/6小鼠和BALB/c小鼠为常用的两种品系小鼠。本研究使用OVA（无佐剂）局部滴鼻的方法，成功建立了BALB/c和C57BL/6品系小鼠的过敏性鼻炎动物模型。并发现BALB/c和C57BL/6小鼠在过敏反应相关指标上有较为显著的差异。与C57BL/6小鼠相比，BALB/c小鼠鼻腔局部过敏炎症反应相对更轻，其血清过敏原特异性IgE、IgG1、IgG2a水平相对更高；其全身TH1，TH2，Treg反应亦相对更强，且随局部过敏原剂量增加，其TH2反应更为显著。C57BL/6小鼠则具有更为显著的局部过敏炎症反应，和相对更轻的全身免疫反应。.同时，我们使用长期局部滴鼻的方法，发现随着一定剂量OVA长期局部暴露，BALB/c小鼠最终可形成局部耐受；而C57BL/6小鼠则不能产生局部耐受。BALB/c小鼠局部耐受的形成，可能与局部活跃的免疫耐受及基因负向主动调控，以及全身Treg功能增强有关；而C57BL/6小鼠虽然Th2相关功能弱于BALB/c小鼠，但其缺乏局部及全身的免疫耐受调控，因此导致局部症状及炎症反应不断增强，最终不能形成局部耐受。另外，对二者差异基因的比较显示，Rps27a，Uba52，Ubc，Kng2，Gnal，C3，Gng7，Gnb3，Reep5，Reep6基因可能介导免疫耐受的关键基因。.我们应用体外培养树突状细胞，以及体外naïve T细胞分选技术，对不同品系小鼠DC细胞进行处理，构建体外耐受性DC细胞，并对之进行流式检测鉴定。在此基础上，以耐受性DC细胞在体外与T细胞进行共培养，观察其对T细胞分化的影响。同时，通过对耐受性DC的优化，为进一步体内过敏状态改变研究奠定了良好的基础。