HAS2调控HMW-HA抑制TMD滑膜血管生成的实验研究

VEGF是颞下颌关节(TMJ)滑膜血管生成的重要诱导因子。最新的研究显示TMD骨关节病（OA）滑膜成纤维细胞(FLS)显著高表达VEGF，导致滑膜组织血管生成；而临床上高分子量透明质酸（HMW-HA）粘补疗法治疗OA，并抑制滑膜成纤维细胞表达炎性因子。本课题组通过体外试验已证实滑膜FLS在缺氧状态下诱导滑膜成纤维细胞受HIF-1α调控表达VEGF; 同时,滑膜FLS受HAS2调控表达HMW-HA。因此，本课题组拟采用高分子量的HA处理OA的滑膜成纤维细胞，研究其对VEGF的抑制作用；通过建立滑膜FLS和脐静脉内皮细胞共培养模型，检测VEGF及受体的表达情况并分析HA浓度与其间的关系；建立兔的TMD-OA模型，观察VEGF及受体的表达和用带有HAS2基因的腺病毒载体治疗OA中滑膜血管生成的效果。本研究为深入研究滑膜血管生成的机制提供必要的理论基础，为OA的基因治疗提供新的技术手段。

以髂松质来源的骨髓间充质干细胞作为阳性对照，定量检测间充质干细胞表面标记物（CD73、 CD90、CD105、CD271）和造血干细胞表面标记物（CD34）在人颞下颌关节滑膜间充质干细胞表面是否有表达。比较间充质干细胞表面标记物CD73、 CD90、CD105、CD271和CD34在颞下颌关节软骨未受损患者和颞下颌关节骨关节病伴关节盘穿孔患者滑膜间充质干细胞上的表达水平。将滑膜来源的间充质细胞置于厌氧环境下，研究高分子量的HA对滑膜细胞分泌HA，PRG4，VEGF的影响，分析HIF-1α对VEGF的调控作用。研究发现颞下颌关节骨关节病患者和髁突软骨未受损患者滑膜间充质干细胞上均阳性表达CD73、 CD90、CD105，而CD34、CD271的表达量比较低。CD34在人颞下颌关节骨关节病患者的滑膜间充质干细胞上的表达水平较髁突软骨未受损患者滑膜间充质干细胞高，这一发现与关节疾病的严重程度密切相关。而厌氧条件下，滑膜细胞大量分泌VEGF，同时保护性的分泌PRG4，HIF-1α调控VEGF的表达。使用高分子量HA能降低VEGF的表达，同时下调HIF-1α的水平，起到早期治疗颞下颌关节紊乱病的作用。