调控miRNA-141抑制膀胱癌转移和降低化疗耐药性的双重作用研究

晚期膀胱癌治疗棘手，防止或减少肿瘤向深部浸润和远处转移；解决晚期膀胱癌的化疗耐药问题是治疗的关键。申请人的前期研究提示miR-141不仅在膀胱癌的上皮-间质转化（EMT）中起重要作用，还对肿瘤的浸润转移能力和化疗耐药性有影响。本课题拟先进行细胞实验，然后深入到动物实验，从两个层面，多个角度进行研究，以期明确升高miR-141的表达是否可以抑制EMT，是否可以可达到同时降低膀胱癌的浸润转移能力和化疗耐药性的目的，并对其机制进行初步探讨。

膀胱尿路上皮癌是泌尿外科的常见肿瘤，而且发病率在逐年增高，研究其发病、发展机制最终有助于其治疗。本课题不仅研究了miR-141在尿路上皮癌中与上皮-间质转化（EMT）之间的关系，并且将研究扩展至所属的miR-200家族，这不仅是完成了预定的课题计划，而且还对课题下一步的研究方向作了探索。实验通过改变miR-200家族成员的表达来研究其对膀胱癌细胞EMT状态、侵袭转移能力、基质金属蛋白酶-2和9（MMP-2,9）的表达和对顺铂的耐药情况的影响。研究首先在五种膀胱癌细胞中检测miR-200家族的表达，发现五个家族成员在CRL1749细胞中表达最低，而在HTB9中表达最高，其中miRNA-141和miRNA-200b表达最高，随后的实验集中于HTB9/CRL 1749 细胞和miR-141/-200b两个家族成员。抑制miR-141/-200b的表达后发现，膀胱癌细胞的更偏向于间质样状态，侵袭能力增强，MMP-2,9的表达增加和对顺铂的耐药能力增强，增强miR-141/-200b的表达后可得出相反的结果。TGF-β1已证明与很多肿瘤的关系密切，本课题还对TGF-β1的表达、膀胱癌EMT状态和miR-200家族之间的关系作了研究。该部分实验选用了HTB9和T24细胞。研究发现过表达的TGF-β1可抑制miR-141/-200b的表达，使膀胱癌细胞向EMT状态中的间质方向分化，变得更具侵袭性。综合起来，本研究证实了miR-200家族中的miR-141/-200b与膀胱癌的关系尤其密切，其表达若受抑制则肿瘤会向间质样分化，更加具有侵袭性和耐药性；而TGF-β1可以抑制miR-141/-200b的表达，由此本课题提出了一个关于膀胱癌侵袭转移的新机制，即TGF-β1过表达可以抑制miR-141/-200b的表达，miR-141/-200b的表达降低后，膀胱癌细胞将向间质样方向分化，从而更具有侵袭性和耐药性。