Notch 信号通路调控小鼠卵泡发育的分子机制研究

Notch信号通路是一种非常重要的信号通路，它在器官发育，肿瘤发生等过程中都发挥重要作用，但是关于Notch信号通路在哺乳动物卵泡发育过程中的作用，目前还没有系统研究，其确切功能还不清楚。我们的前期研究结果显示，Notch信号通路的成员在卵细胞和颗粒细胞中有广泛表达，而且用Notch通路的抑制剂处理后，体外培养卵泡的发育受到明显抑制，说明Notch信号通路对卵泡的发育有非常重要的作用。本研究将利用体外卵泡培养系统和条件性敲除的动物模型，系统研究Notch信号通路在卵泡发育过程中的作用机制，从而进一步深入了解卵泡发育的调控机制。

Notch信号通路是一种非常保守的信号通路，它通过调控细胞的增殖、分化，和凋亡参与多种生理和病理过程。关于这个信号通路在不同组织和器官发育过程的功能有很多相关的研究。但是关于这个信号通路在卵泡发育过程中的功能还没有报道，以前的研究已经发现Notch信号通路的成员在卵巢颗粒细胞中有表达，但是功能未知。为了研究Notch信号通路在卵泡发育过程中的功能，我们建立了体外培养系统，然后利用L-658,458 和DAPT特异性阻断Notch信号通路。结果发现阻断Notch信号通路后，卵泡的发育受到明显的抑制，并伴随大量的颗粒细胞脱落和死亡。进一步研究发现，颗粒细胞的增殖受Notch信号通路的调控，阻断Notch信号后，体外培养颗粒细胞的增殖受到抑制，同时c-Myc的表达也明显降低，而c-Myc有促进细胞增殖的功能。因此我们推测Notch信号通路可能是通过调控c-Myc的表达而调控卵泡颗粒细胞的增殖，而从参与乱跑的发育过程。为了证明这个假设，我们利用慢病毒系统在颗粒细胞中过表达c-Myc基因。结果发现过表达c-Myc能明显促进颗粒细胞的增殖，同时还能够挽救由于阻断Notch信号通路而导致的细胞增殖抑制。这些结果证明Notch信号通路是通过调控颗粒细胞增殖而参与卵泡发育的调控。