CGRP在糖尿病周围神经病变中的作用及活血解毒方对其的影响

临床及动物实验均证明活血解毒方可改善糖尿病周围神经病变，同时糖尿病大鼠坐骨神经超微结构变形程度好转，CGRP显著升高；文献研究发现CGRP在糖尿病神经中表达下降，并且CGRP具有促进轴突再生，雪旺细胞增生，影响离子通道等作用，并与糖尿病神经病变其他影响因素有密切关系；因此，我们推测CGRP对糖尿病周围神经组织及细胞可能具有保护作用。我们将应用siRNA及转基因技术，分别在背根神经元、雪旺细胞及糖尿病小鼠中，检测CGRP对神经组织及细胞功能、结构的影响；同时进一步观察活血解毒方对CGRP亚型及调控因子的作用。本研究对揭示糖尿病神经病变的机制及阐明中药复方的药效机理具有重要意义。

背景方向 糖尿病周围神经病变发病率高，发病机制不明，无理想药物。活血解毒方可改善糖尿病周围神经病变，同时坐骨神经内CGRP显著升高；文献提示，CGRP在糖尿病大鼠神经中下降，并且CGRP具有促进轴突再生、施万细胞增生，影响离子通道等作用。 主要内容 因此，课题组应用转基因技术，分别在神经细胞、施万细胞、糖尿病小鼠中，检测CGRP对神经组织及细胞的影响，同时进一步观察活血解毒方对CGRP亚型及调控因子的作用，以揭示CGRP对糖尿病周围神经病变的保护作用以及活血解毒方的药理机制。重要结果关键数据 结果表明，CGRP慢病毒转染至细胞内，神经细胞活力增加25%，SOD活力增加（模型组1.086U/ml，CGRP组2.181U/ml），MDA含量下降17% (模型组4.106nmol/ml降至4.782 nmol/ml)。施万细胞活力增加，氧自由基减少，SOD活力增加47%，MDA含量降低13%。Adeno-CGRP肌肉注射至糖尿病小鼠内，可使神经传导速度增快，热板潜伏期缩短。活血解毒方使糖尿病大鼠脊髓内CGRPα亚型mRNA增加22%（模型组0.96﹠活血解毒方组1.07），CGRPβ亚型mRNA的水平增加16%（模型组1.03﹠活血解毒方组1.22），同时促进坐骨神经内AC表达升高100%、cAMP浓度升高25%、PKA蛋白升高55%，及CaM升高19%。同时减少坐骨神经内PKC、MDA 的生成，抑制AGE、RAGE、NFκB。结论 本课题结果表明CGRP可能通过抑制氧化应激保护神经细胞、施万细胞，从而改善糖尿病小鼠周围神经病变；活血解毒方通过AC-cAMP-PKA途径及CaM途径促进CGRP的表达，同时通过抑制坐骨神经内氧自由基、糖基化终产物受体等途径改善糖尿病大鼠周围神经病变。科学意义 本课题已经发表文章5篇，首次研究了CGRP对高葡萄糖刺激的神经细胞及施万细胞的保护作用，揭示了CGRP在糖尿病周围神经病变发病机制的作用，对深入认识糖尿病周围神经病变的发病机制，阐明中药药效的机理具有重要意义。