从调节树突状细胞TLR8活化通路研究凉血解毒方治疗银屑病的分子机制

The abnormally activated Dendritic Cells(DCs) are the initial link in Psoriasis. Once being activated via Toll Like Receptor 8 agonists, DCs secrete IL-23, which trigger Th1 inflammatory response and active IL-23/IL17 axis, a cytokine storm is formed and it is a vicious circle. This is one of important foundations of persist inflammatory in psoriasis lesions.Blood-heat psoriasis are the main syndrome type, the pathogenesis is ‘toxin generated from blood-heat’, to treat with ‘Cooling blood and detoxification’ methods, “LiangXueJieDu” decoction is efficient treatment. Previous studies have demonstrated that blood-cooling and toxin-relieving herbs can inhibit the maturation of DCs and reduce the secretion of IL-23. Based on these clues, in this study, we will study on the correlation between DCs and lesions，the expression of relevant proteins on TLR8 signal pathway in Imiquimod-induced Psoriasis-Like Skin mice, and investigate the effect of ‘LiangXueJieDu’ decoction. Furthermore, we will investigate the effect of ‘LiangXueJieDu’ decoction and its main components on maturation, function and the expression of relevant proteins on TLR8 signal pathway of TLR8 agonist R848 induced DCs. All above are used for integrative study of ‘syndrome, principle and efficiency’ to enrich TCM theory of ‘Cooling blood and detoxification’...

树突状细胞（DC）的活化异常是银屑病发病的启始环节，通过TLR8的激活分泌IL-23，介导IL-23/IL-17轴的激活。目前针对DC的功能变化成为治疗银屑病的新靶标之一。中医以血热证为主，病机为血热生毒，治以凉血解毒。我们提出银屑病血热证以素体“内热”为本，在内外因作用下，导致DC的过度活化产生大量的细胞因子是“血热生毒”的启始关键，凉血解毒方可阻断DC异常活化是治疗银屑病的关键这一假说。前期研究发现凉血解毒中药具有抑制DC成熟及分泌IL-23的作用。据此线索本研究以TLR8激动剂咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠为对象，研究其皮损和DC活化的相关性及TLR8信号转导通路相关蛋白表达的改变，并观察凉血解毒方的干预效应；进一步以TLR8激动剂R848诱导的DC模型为对象，观察凉血解毒方及其主要成分对DC分化、成熟、功能及TLR8信号转导通路相关蛋白的影响，明确其作用靶点，丰富银屑血热证的病机理论。

树突状细胞（DC）的活化异常是银屑病发病的上游环节，通过TLR8的激活分泌IL-23，介导IL-23/IL-17轴的激活。目前针对DC的功能变化成为治疗银屑病的新靶标之一。中医以血热证为主，病机为血热生毒，治以凉血解毒。我们提出凉血解毒方可阻断DC异常活化是治疗银屑病的关键这一假说。前期研究发现凉血解毒中药具有抑制DC成熟及分泌IL-23的作用。. 本研究以TLR8激动剂咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠为对象，研究其皮损和DC活化的相关性及TLR8信号转导通路相关蛋白表达的改变，并观察凉血解毒方的干预效应；进一步以TLR8激动剂R848诱导的DC模型为对象，观察凉血解毒方及其主要成分对DC分化、成熟、功能及TLR8信号转导通路相关蛋白的影响。. 结果显示：凉血解毒方全方及主要药物紫草、丹皮的主要成分β，β-二甲基丙烯酰阿卡宁（DMA）及丹皮酚（Pae）可以改善IMQ诱导的银屑病样小鼠的皮损，降低PASI评分，减轻表皮角化不全，减少角质形成细胞增殖，降低皮肤厚度，降低真皮层中CD3+细胞数量，减少脾脏及皮损中CD11c+细胞数量，降低皮损中IL-23、TLR7、TLR8 及IL-12p40mRNA表达，降低TLR8的表达。体外研究发现，凉血解毒方可以抑制DC2.4细胞株IL-23mRNA、IL-1βmRNA、IL-12p40mRNA的表达IL-23、IL-1β等细胞因子的分泌；DMA可抑制人外周血单核细胞来源的树突状细胞促进T细胞增殖的作用；抑制细胞IL-12p40、IL-1β、TNF-α、IL-23 mRNA的表达，升高IL-10 mRNA表达；抑制IL-1β、TNF-α、IL-23、IL-10细胞因子分泌；DMA可降低小鼠骨髓来源的树突状细胞表面I-E/I-A、CD80及CD86的表达，抑制细胞IL-1β、IL-12p40mRNA的表达及IL-1β、IL-12及IL-23的分泌，抑制DC诱导T细胞向Th1、Th17及Treg分化，降低细胞TLR7、TLR8、MyD88、P-p65、P-stat3、P-stat、 IRAKM蛋白的表达。Pae可降低I-E/I-A、CD80及CD86的表达，抑制IL-23mRNA的表达及 IL-12p40、IL-23p70分泌。. 由此我们推断，凉血解毒方及其主要成分可能通过抑制TLR8—DC活化通路发挥治疗银屑病的作用