远志皂苷PTM16对自噬/溶酶体途径影响的研究

帕金森病（PD）是常见的神经退行性疾病，尚无有效的治疗药物。自噬/溶酶体功能障碍能够导致神经退行性病变，而自噬增强剂雷帕霉素对PD模型具有神经保护功能，因此研制能够增强自噬/溶酶体途径的化合物是治疗PD的新方向。中药远志在治疗PD方面很有优势，但未见有从自噬/溶酶体方面对其进行研究的报导。前期研究发现远志皂苷单体PTM16对PD模型发挥神经保护作用，其作用可能与自噬/溶酶体途径有关。因此，本项目拟采用现代药理学方法，结合分子生物学技术，构建多种检测自噬的模型，通过过表或沉默自噬相关基因，从形态学、生化学两个视角，在细胞水平和动物水平观察PTM16对神经细胞显微结构和超微结构的影响，并动态观察自噬体的产生、融合等过程的变化，明确PTM16对自噬/溶酶体途径及信号通路的影响，阐明其神经保护作用的机制，为远志的广泛应用奠定理论基础，也为抗PD药物的研制提供广阔平台。

帕金森病（PD）是常见的神经退行性疾病，尚无有效的治疗药物。自噬/溶酶体功能障碍能够导致神经退行性病变，而自噬增强剂雷帕霉素对PD模型具有神经保护功能，因此研制能够增强自噬/溶酶体途径的化合物是治疗PD的新方向。中药远志在治疗PD方面很有优势，但未见有从自噬/溶酶体方面对其进行研究的报导。前期研究发现远志皂苷单体PTM16对PD模型发挥神经保护作用，其作用可能与自噬/溶酶体途径有关。近三年，本项目采用现代药理学方法，结合分子生物学技术，主要完成了三部分的研究工作：1、采用离子交换树脂法、硅胶提取法，对远志的活性成分P6中的各种成分加以分离，鉴定其化学结构。2、构建了LC3及Lamp2等多种检测自噬的模型，可用于化合物的筛选与研究；3、研究PD相关基因α-突触核蛋白与自噬的关系，研究发现PD相关基因α-突触核蛋白能够导致自噬功能障碍，该机制可能与JNK1-BCl-2有关；4、研究神经毒性剂Rot与自噬的关系，结果发现Rot能够导致α-突触核蛋白的聚集，抑制细胞的自噬功能。研究还发现Rot所导致的α-突触核蛋白与细胞内钙离子的增加有关，给予钙离子螯合剂可抑制α-突触核蛋白的聚集，而且也能够改善自噬状态。由此说明Rot诱导的α-突触核蛋白的聚集与自噬功能受到抑制有关。5、同时还研究了PTM16与自噬的关系，发现PTM16能够缓解因Rot而导致的自噬功能的减弱，促进自噬底物p62的降解，同时还能够降低α-突触核蛋白的聚集，发挥神经保护功能。.经过三年的研究，已完成申请书中的研究内容，发表文章11 篇，其中SCI收录的文章8篇，申请专利2项，协助培养研究生4名，获得省部级以上的奖励1项，超额完成任务书要求的各项考核指标。