骨髓CD8+ T细胞与巨核细胞参与自身免疫性骨髓纤维化的机制探究

Myelofibrosis is a myeloproliferative neoplasm characterized by stem cell-derived clonal myeloproliferation, bone marrow fibrosis induced by myofibroblast proliferation and reticulin fiber distribution, anemia, splenomegaly, extramedullary hematopoiesis. Bone marrow fibrosis can also accompany well known autoimmune diseases, called autoimmune myelofibrosis (AIMF). Although several genetic mutations are reported to be associated with primary myelofibrosis, pathogenesis of AIMF remains unknown, with only palliative treatment against certain symptoms. Recently we found CD8+ T cells and IFN-γ are critical using murine model of AIMF. In this project, we will investigate the role of bone marrow CD8+ T cell and megakaryocyte interaction in the development of AIMF using strategies such as megakaryocyte depletion and in vitro co-culture. In the meantime, we will search for pathogenic CD8+ T cell subset using in vitro co-culture system, adoptive transfer and TCR repertoire sequencing. This project will provide experimental evidence for further understanding of the pathogenesis of AIMF and clinical targeting therapy.

骨髓纤维化是一种髓系细胞增生性肿瘤，其特征包括干细胞来源的髓系细胞克隆增殖、骨髓成纤维细胞增多和网状纤维分布导致的骨髓纤维化、贫血、脾肿大、髓外造血等。骨髓纤维化也会伴随已知的自身免疫病出现，称之为自身免疫性骨髓纤维化（AIMF）。虽然原发性骨髓纤维化已经报道与多种基因突变有关，关于AIMF的发病机制几乎处于未知状态，治疗手段也只有针对症状的缓解性治疗。我们近期利用AIMF模型小鼠研究发现，CD8+ T细胞及细胞因子IFN-γ是导致AIMF的关键因素。本研究中，我们将通过清除巨核细胞、体外共培养等手段进一步探究骨髓CD8+ T细胞与巨核细胞相互作用在自身免疫性骨髓纤维化发生过程中的作用及其机制，同时利用体外培养、体内转输和免疫组库测序等方法寻找具有致病作用的骨髓CD8+ T细胞亚群，为深入理解自身免疫性骨髓纤维化的发病机制，以及针对性的临床治疗提供实验依据。

自身免疫性骨髓纤维化(AIMF)是一种以骨髓纤维化、贫血、脾肿大、髓外造血为特征的自身免疫性疾病，发病机制不清。我们前期研究发现，骨髓中增多的CD8+T细胞及细胞因子IFN-γ是疾病发生的关键。我们提出骨髓中CD8+T细胞可能通过产生细胞因子IFN-γ作用于巨核细胞，导致巨核细胞的扩增，引起骨髓纤维化。在本研究中，我们发现1）在疾病早期，巨核细胞增多，而晚期巨核细胞减少；2）在模型鼠中敲除CD8后，巨核细胞形态恢复，其中敲除IFN-γ后部分恢复，说明CD8+T细胞可能通过非IFN-γ的途径影响骨髓纤维化进展；3）模型鼠骨髓CD8+T细胞高表达活化相关基因，以及驻留相关基因，其中CD8+Trm细胞增多；4）SIP激动剂FTY720处理不能减轻模型鼠骨髓纤维化症状，可能原因是模型鼠骨髓CD8+Trm细胞比例没有变化；5）环孢素CsA可以减轻模型鼠骨髓纤维化症状，降低模型鼠骨髓CD8+T细胞数量；6）骨髓衰竭过程中，CD38+CD8+T细胞具有Trm表型，可能是导致疾病发生的关键。我们的研究提示了CD8+Trm细胞可能是自身免疫性骨髓纤维化的关键致病细胞，靶向这群细胞可能是疾病治疗的新策略。