肝脏NK细胞及其NCRs受体在HBV-ACLF肝细胞损伤中的作用机制研究

我们前期研究发现，在小鼠暴发性肝衰竭中，肝脏NK细胞可通过Fas/FasL和NKG2D/NKG2DL途径损伤肝细胞,在HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)中，肝脏NK细胞的频率显著增加，外周血NK细胞天然细胞毒受体(NCRs)的表达也显著增强，因此推测肝脏NK细胞在HBV-ACLF肝细胞损伤中发挥重要作用。本研究以人体肝脏NK细胞为主要研究对象，收集HBV-ACLF病人肝移植术中切除的肝组织，分离肝脏淋巴细胞，运用多色流式技术分析肝脏NK细胞各亚类的比例、受体表达、杀伤活性及细胞因子水平，明确HBV-ACLF病人肝脏NK细胞的生物学特征及功能；体外用阻断抗体和microRNA干扰质粒阻断NCRs识别途径，观察其对NK细胞功能的影响，探讨NCRs在HBV-ACLF肝损伤中的作用。本研究将有助于进一步揭示HBV-ACLF免疫学发病机制，为寻求防治HBV-ACLF的新靶点提供理论依据。

肝脏NK细胞在HBV相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)免疫介导的肝损伤中的作用仍未阐明。我们前期的研究已经发现，在HBV-ACLF中，肝脏NK细胞的数量显著增加，外周血NK细胞天然细胞毒受体(NCRs)的表达显著增强。本课题进一步研究了肝脏NK细胞及其天然细胞毒受体（NCRs）在HBV-ACLF免疫介导的肝损伤中的作用。我们的研究发现，相对于轻度慢乙肝（CHB）病人，HBV-ACLF病人肝脏NK细胞的比率显著下降，肝脏NK细胞NKP30受体的表达显著增强，而NKP46、NKG2D、NKG2A和CD158a的表达未见显著差异。NKP30特异性配体B7-H6及炎症细胞因子IL-32在HBV-ACFL肝组织中高表达，并且均与肝损伤程度显著正相关。通过体外实验进一步证实，在HBV-ACLF中，肝脏NK细胞可能通过NKP30-B7-H6的特异性识别上调IL-32表达而诱导肝细胞损伤。本研究为揭示HBV-ACLF免疫学发病机制，为防治HBV-ACLF提供了重要的新靶点和理论依据。