活化巨噬细胞源Exosome促淋巴管新生致AS斑块不稳定的机制研究

前期研究结果发现，血管外膜淋巴管新生促进了内膜炎症反应和增生,启动并推动AS斑块不稳定的进程。但淋巴管新生机制至今未阐明。本课题拟采用转化医学的研究模式，以巨噬细胞源exosome为工具，从细胞和整体水平检测多重或单一AS危险因素调控巨噬细胞源exosome的分泌，及活化TLRs受体/NF-кB/cox-2/VEGF信号通路蛋白的表达。并观察对淋巴管内皮细胞增殖迁移，及成管能力影响。通过特异抗体及基因干扰技术特异阻断各信号通路蛋白研究各蛋白在淋巴管新生的作用。体内研究，以apoE-/- 和apoE-/- TLR4-/-双敲小鼠为研究基础，观察活化巨噬细胞源exosome过表达对早期及晚期斑块的作用；检测外膜淋巴管新生，及信号通路蛋白表达。从正反两方面探讨exosome-TLRs结合体促进血管外膜淋巴管新生及其在斑块形成发展中的作用，为稳定易损斑块提供新的有效治疗靶点。

前期研究结果发现，血管外膜淋巴管新生促进了内膜炎症反应和增生,启动并推动AS斑块不稳定的进程。但淋巴管新生机制至今未阐明。本课题以巨噬细胞源exosome为工具，从细胞和整体水平检测AS危险因素调控巨噬细胞源exosome的分泌。研究结果显示1. 不稳定心绞痛组与急性心梗组，活化巨噬细胞源exosome及氧化应激通路相关基因TLR4 mRNA，NF-кB mRNA，COX-2 mRNA，VEGF mRNA显著增加。2.细胞水平，通过基因干扰技术特异阻断各信号通路蛋白，发现活化巨噬细胞源exosome-TLR4/NF-кB/cox-2/VEGF淋巴管新生信号通路存在。3.体内试验，以apoE-/- 和TLR4干扰apoE-/-小鼠为研究基础，进一步验证活化巨噬细胞源exosome-TLR4/NF-кB/cox-2/VEGF淋巴管新生信号通路，为稳定易损斑块提供新的有效治疗靶点。