Notch受体在浸润性膀胱癌中异常活化的分子机制及生物学效应研究

本课题申请人前期研究发现，膀胱癌与正常组织相比Notch受体表达下调，但在浸润性膀胱癌中Notch受体异常活化，与非浸润性膀胱癌相比表达水平上升，且细胞定位显著不同。沉默Notch-1受体可显著抑制浸润性膀胱癌细胞增殖并促进凋亡，Notch受体在非浸润和浸润性膀胱癌中可能分别起抑癌和促癌的双向作用，其异常活化可能是介导非浸润性膀胱癌进展的因素之一。以上述发现为基础，本课题拟从Notch受体在浸润性膀胱癌中异常活化的机制入手，研究基因突变等因素在其中的作用；应用RNAi技术分别沉默异常活化的各Notch受体，研究它们对PI3K信号通路活性的影响；探讨Notch和PI3K信号通路阻断剂对浸润性膀胱癌细胞和原位动物模型的作用。最终阐明Notch受体异常活化的具体机制，及对下游因子和PI3K信号通路的影响，可为膀胱癌的治疗提供新的靶点和理论依据。

本课题前期研究发现浸润与非浸润性膀胱癌相比Notch1-3 受体表达显著升高，Notch-1 在不同分期的膀胱癌中可分别起抑癌和促癌的反向作用，沉默Notch-1可显著抑制浸润性膀胱癌细胞增殖并促进凋亡，Notch 受体异常活化可能是介导非浸润性膀胱癌进展的因素之一。因此以此基础，按照从Notch 信号通路中Notch 受体在浸润性膀胱癌异常活化的机制入手，研究基因突变等因素在其中的作用；应用RNAi 技术沉默异常活化的Notch 受体，研究各Notch 受体对PI3K-AKT 信号通路活性的影响；探讨Notch 受体阻断剂对浸润性膀胱癌细胞和动物模型的作用。最终阐明Notch 受体异常活化的具体机制，以及其对下游因子和PI3K 信号通路的影响，为膀胱癌的治疗提供新的靶点和理论依据。鉴于本中心近年来肾肿瘤样本量的大量增加，以及国内外肾癌研究的进一步深入，本课题在研究Notch信号通路在浸润性膀胱癌中的作用机制的同时，同时增加了 Notch信号通路在肾透明细胞中的发生发展机制的研究。课题进行过程中共收取623例膀胱癌肿瘤标本、1256例肾透明细胞癌标本，相应的癌旁组织，患者术前术后全血、血清，按照国际肿瘤及血液样本收取、保存和随访标准，建立完善的膀胱癌样本库。同时完成了Notch信号受体作用机制的研究，包括Notch1及其配体jagged1和在膀胱癌及肾癌中表达检测和Notch1及其下游靶基因的表达变化情况的检测。 本研究开展期间，培养博士研究生4名，硕士研究生4名，博士后2名。参加国际学术交流会议3次，国内学术会议6次。发表SCI论文2篇，待发表SCI论文3篇。