EphA2/ephrin-A1在卵巢癌干细胞内皮转分化中的作用和分子机制

由癌细胞管状排列而成的血管生成拟态（VM）是卵巢癌微循环的最初模式，在肿瘤早期生长、侵袭和转移中发挥重要作用，但目前尚不清楚这群细胞的生物学特性、转归及其机制。国外和我们的前期研究发现，这群细胞具有多能的、胚胎样的表型，早期即高表达EphA2/ephrin-A1，多种与内皮细胞或基质形成有关的基因的表达也显著上调，结合文献报道，提出：卵巢癌干细胞参与构成VM并可向内皮细胞转分化，EphA2/ephrin-A1调控MMP2促进干细胞形成VM的同时，通过激活IKKβ-NF-κB途径诱导内皮细胞转分化。本项目拟在观察卵巢癌组织中EphA2的表达与卵巢癌干细胞的分布及VM形成关系的基础上，利用前期已获得的卵巢癌干细胞并建立小鼠移植瘤模型，在体和离体研究EphA2/ephrin-A1对卵巢癌干细胞成管和内皮转分化的调控作用及机制，以揭示卵巢癌血管生成新机制，为卵巢癌抗血管治疗提供新靶点。

本项目的假设是EphA2/ephrin-A1调控MMP2促进干细胞形成VM的同时，通过激活IKKβ-NF-κB途径诱导内皮细胞转分化，进一步参与肿瘤微循环。本课题组从卵巢癌细胞系A2780诱导去分化获得干细胞性质的A2780源干细胞（Cancer Stem Cells, CSCs)，通过RT-PCR和Western Blotting 比较EphA2在CSC、A2780和HUVEC中的表达差异和检测上述细胞的成管能力，同时检测EphA2在卵巢癌组织中的表达和分布情况，证实EphA2表达量与细胞成管能力之间存在正相关关系；构建EphA2过表达慢病毒载体转染CSCs，RT-PCR、Western Blotting和代谢组学检测证实获得稳定转染细胞株，下一步拟对稳转株进行MMP2和IKKβ-NF-κB通路的阻断，验证两者在EphA2促进卵巢癌干细胞形成血管拟态和诱导内皮转分化中的作用。已发表相关SCI论文一篇。