金属蛋白酶ADAMTS-18在动脉血栓形成中的作用及其机制研究

GP49 抗体是我们在国际上率先发现的一种独特抗体,它与血小板膜GPIIIa49-66表位结合后，可启动"补体-非依赖性血小板氧化破碎"途径。我们最新研究发现，内皮细胞分泌的金属蛋白酶ADAMTS-18为GPIIIa49-66表位的生理配基，它可通过C-末端序列与活化血小板结合。人工合成的ADAMTS-18蛋白C-末端片段可诱导血小板氧化破碎。提示ADAMTS-18蛋白作为血小板膜GPIIIa49-66表位的生理配基，可能在体内通过氧化破碎活化血小板的方式影响血栓形成。为了揭示ADAMTS-18蛋白在动脉血栓形成中所起的作用及其机制，本项目拟进行以下研究：1）血栓病人体内ADAMTS-18蛋白活性检测；2）ADAMTS-18蛋白活性调控机制；3）ADAMTS-18蛋白活性与动脉血栓形成间的关系。预期结果对于重新认识体内血栓形成机制及发现新的疾病诊断及治疗靶点具有重要理论创新价值。

ADAMTSs家族与发育、组织重塑、炎症与凝血及肿瘤发生等密切相关。adamts18是一种“孤儿ADAMTSs”，其功能未知。国际上尚未见有关adamts18与动脉血栓形成关系的报道。 1）我们首次以临床血栓病人血样为研究对象，发现ADAMTS-18在血栓病人中改变不明显，提示ADAMTS-18在动脉血栓形成中有可能仅起微调作用；2）血管内皮细胞被凝血酶激活后，受损局部产生的调控因子可促进激活内皮大量合成并分泌ADAMTS-18 蛋白；凝血酶可在ADAMTS-18 蛋白spacer区域切割ADAMTS-18释放~45KDa的C-末端活性片段，诱导血小板氧化破碎；3）动物实验进一步证实ADAMTS-18特异性抗体封闭ADAMTS-18蛋白功能后可促进颈动脉血栓形成；4）在短暂性缺血性脑卒中形成模型中，ADAMTS-18蛋白在卒中发生后4h表达最高，注射治疗性抗体SLK后ADAMTS-18表达减弱，45h后恢复正常。 因此，ADAMTS-18可能通过“血小板内氧化破碎通路” 在血栓形成早期微调动脉血栓的形成。此项研究工作为揭示体内动脉血栓的形成及调控机制提供了新的理论依据。新型金属基质蛋白酶ADAMTS-18的发现和认识将有可能为临床动脉血栓相关性心脑血管患者的早期诊断及治疗提供新思路和新靶点。