丹红注射液治疗大鼠肺动脉高压作用及机制研究

丹红注射液广泛用于治疗心脑血管疾病，具有明确的血管内皮保护作用，但对于肺血管的作用及其作用靶点仍不清楚。我们在前期研究的基础上发现丹红注射液能降低肺动脉高压大鼠的肺动脉压，增加血浆及组织一氧化氮（NO）含量，因此推测丹红注射液有治疗肺动脉高压的作用，其作用靶点可能为肺血管内皮细胞一氧化氮合酶（eNOS）。本课题拟以野百合碱所致肺动脉高压大鼠以及eNOS缺陷型（eNOS-/-）小鼠为研究对象，明确丹红注射液治疗肺动脉高压的疗效，探讨其对肺血管内皮细胞NO途径以及eNOS表达的影响。体外siRNA干扰大鼠肺微小动脉内皮细胞eNOS基因，验证丹红注射液保护肺血管内皮细胞的作用靶点，为中药丹红注射液治疗肺动脉高压提供理论基础，对于肺心病的防治具有重要的临床和应用价值。

基本按照申请项目申请所述计划内容完成主要的研究目标和研究内容，研究经费使用和分配合理，目前已经发表2篇标注该项目编号的sci论文，2篇letter，11篇发表国际会议摘要，申请发明专利3项，1项授权，培养研究生4名以上，国际大会发言3次。相对于临床上使用的肺动脉高压靶向治疗药物而言，中医中药对于疾病的防治也有非常重要的科学意义。丹红注射液是由丹参和红花提取而成的复方注射剂，主要成分为丹参酮、丹参酸、丹参酚及红花黄色素、红花酚和儿茶酚等化学成分，在临床上广泛用于淤血闭阻所致心脑血管疾病诸证，具有活血化瘀、通脉舒络之功效，疗效显著。丹参素能直接扩张肺小动脉，减少肺循环阻力，降低肺动脉压，增加心输出量，改善肺血管顺应性。通过本次自然科学基金项目的探索，我们初步证明丹红注射液具有治疗肺动脉高压的疗效。建立野百合碱诱导大鼠肺动脉高压模型，连续腹腔给予三个不同剂量通心络（2g/kg/天，4g/kg/天以及8g/kg/天），共21天。结果表明丹红注射液（2g/kg，D2）可显著降低肺动脉高压大鼠右心室收缩末压力，但中（4g/kg，D4）、大（8g/kg，D8）剂量给药组均未见差异；丹红小（D2）、中剂量组（D4）均可显著增加肺动脉高压大鼠的心输出量（p=0.02和p=0.01），但大剂量给药组未见差异；丹红小（D2）剂量组可显著降低增加肺动脉高压大鼠的PVR（p=0.02），但中、大剂量给药组均未见差异；丹红注射液对肺动脉高压大鼠右心室肥厚改善效果不明显。此外，丹红小剂量组可明显改善肺小动脉重构，抑制肺动脉平滑肌细胞增殖，促进凋亡，降低肺血管炎症反应。使用丹红可显著增加肺组织和血浆中一氧化氮浓度及超氧化物歧化酶（SOD）活性，下调肺组织中氧化应激产物：8-异前列烷（8-isoprostane）和硝基酪氨酸（nitroyrosine）浓度，上调谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）以及肺组织SOD2蛋白表达以及活性，推测丹红治疗肺动脉高压可能通过改善机体氧化应激水平发挥作用。本项目取得了应用方面的进展，为进一步开展丹红注射液治疗或辅助治疗肺动脉高压临床实验，提供了可靠的实验室依据和询证医学证据，具有广阔的前景。