姬松茸多糖佐剂调节树突状细胞诱导抗肿瘤Th1型细胞免疫应答的分子机制研究

树突状细胞（DC）摄取肿瘤抗原诱导免疫激活或抑制取决于肿瘤细胞释放"危险"信号还是抑制性信号。在"危险"信号的调节下，激活Th1型细胞免疫应答清除肿瘤。天然免疫系统释放的细胞因子和共刺激分子被免疫系统视为肿瘤的"危险"信号。我们前期研究发现姬松茸多糖作为免疫调节剂可刺激天然免疫系统，推测其有可能通过提供"危险"信号而产生免疫佐剂效应。本项目利用EG7肿瘤模型，以卵清蛋白（OVA）作为拟抗原，研究OVA和姬松茸多糖作用后，对Th细胞极化和细胞毒性T淋巴细胞应答的影响。在DC细胞上观察姬松茸多糖对Syk-NF-kappaB信号通路的影响，明确姬松茸多糖是否通过促进细胞因子分泌和共刺激分子表达等"危险"信号的产生，促进肿瘤特异性抗原的呈递，启动抗肿瘤特异性免疫。本项目有望扩展对姬松茸多糖的传统认识，为肿瘤免疫治疗的研究提供新的思路。

背景：树突状细胞摄取肿瘤抗原诱导免疫激活还是抑制取决于肿瘤细胞释放危险信号还是抑制性信号。在危险信号的调节下，激活Th1细胞免疫应答清除肿瘤。天然免疫系统释放的细胞因子和共刺激分子被免疫系统视为肿瘤的危险信号。基于姬松茸多糖作为免疫调节剂能够刺激天然免疫系统，本研究的目的是验证 “姬松茸多糖是一种提供危险信号的免疫佐剂”的科学假说。..主要研究内容：本研究利用EG7肿瘤模型，以OVA作为拟抗原，研究OVA和姬松茸多糖作用后，对TH 极化和CTL 应答的影响。利用DC细胞，在体外观察姬松茸多糖对dectin-1-Syk信号通路的影响。..重要结果：1、姬松茸多糖与OVA联合处理抑制了E.G7小鼠肿瘤生长，促进了E.G7荷瘤小鼠脾淋巴细胞特异性增殖，提高了血清中IgG2b 抗体水平，促进Th1型免疫应答，提高了血清中IL-2和IFN-γ含量和T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比值。2、姬松茸多糖处理的DCs具有刺激同种异体T淋巴细胞增殖能力，姬松茸多糖与OVA联合处理增强T细胞增殖能力，上调了DC细胞Dectin-1、p-Syk、CARD9蛋白和mRNA表达，增加了DCs培养上清中IL-2、IL-23和IL-12p70、IFN-γ、TNF-α、IL-6和IL-10含量和mRNA表达，增加了DCs中CD11c、CD40、B7-2、B7-1、MHCII和MHCI蛋白表达，提高细胞毒T淋巴细胞细胞毒性。中和性抗体封闭Dectin-1逆转了姬松茸多糖与OVA联合处理诱导的IL-12p70、IL-23、TNF-α和IFN-γ分泌增加。3、ABP-AW1联合OVA促进小鼠脾淋巴细胞分泌Thl和Th2细胞因子产生，上调了小鼠脾淋巴细胞IL-10、IL-4、IL-2、IFN-γ、GATA-3和T-bet的mRNA表达，增加IgG、IgG1和IgG2b抗体产生，增加血液中CD4+T和CD8+T淋巴细胞，增加CD4+T淋巴细胞活化和IFN-γ分泌。..科学意义：我们的研究证实了姬松茸多糖与OVA联合处理促进小鼠Th1型免疫应答，其机制与姬松茸多糖促进dectin-1-Syk信号通路有关。本研究扩展了对姬松茸多糖的传统认识，为肿瘤免疫治疗的探索研究提供新的思路。