5p15 CNVs中HPV整合与TRIO基因扩增在宫颈癌发生中的机制探讨

宫颈癌是女性生殖系统最常见肿瘤。HPV与宿主相互作用共同导致癌症发生。本课题组前期以HPV整合及宿主拷贝数变异（CNVs）为生物学指标，筛选出5p15及该片段内的关键基因TRIO；生物信息学分析提示，TRIO在HPV整合及宿主遗传两方面的致癌作用中扮演重要角色。本项目拟采用新一代测序技术，准确分析5p15中HPV断裂部位、整合位点；利用锌指酶打靶技术定点整合HPV，进一步靶向封闭TRIO，观察封闭前后细胞生物学行为变化，并在模式生物中模拟该生物学过程；在体外模型中转染TRIO各突变体慢病毒载体；借以阐明HPV整合与TRIO在宫颈癌发生过程中的作用及机制。课题从HPV和宿主两方面入手不仅可丰富宫颈癌发生理论，还可根据HPV在5p15的整合及TRIO的变异预判高危人群，并进一步通过靶向TRIO恢复细胞的生物学功能，为实现宫颈癌的早期防治提供新思路。

宫颈癌发病率占妇女肿瘤中的第二位。虽然已知HPV是宫颈癌发生的重要因素，但是80%-90%HPV感染者均会好转，仅有少部分人会最终进展为宫颈癌。因此，推出HPV与宿主之间相互作用最终导致了癌症的发生。本课题组前期利用激光捕获显微切割技术（LCM），比较基因组杂交芯片（CGH）筛选出候选基因，并通过荧光原位杂交技术（FISH）验证TRIO基因在宫颈癌的扩增。另外本项目还在较大的临床样本中验证TRIO基因的表达以及评估分析其与临床预后的关系。在深入机制方面，通过挖掘TRIO前两个功能域下游两条相对独立的通路，发现TRIO基因的扩增通过形成侵袭性伪足以使宫颈癌细胞达到侵袭转移的目的。但是TRIO的过表达与侵袭性伪足形成之间的具体机制部分仍有待研究。