体内VitA通过RA信号调节凋亡影响HIBD自修复的作用和机制研究

缺血缺氧脑损伤（HIBD）是新生儿期高发的神经系统疾病，治疗手段有限预后不良。维生素A缺乏（VAD）是全球性营养缺乏病，新生儿是其最高危人群，国内外无两者结合的相关研究。本课题组前期临床试验发现HIBD患儿VAD呈高发水平，且缺乏程度严重，动物实验发现rMSC移植治疗HIBD新生鼠，VAD鼠预后空间记忆力和主动学习力均显著弱于VA正常鼠。联系VA及其活性产物视黄酸(RA)在神经分化发育，机体损伤修复中所起的重要作用。我们认为体内VA水平影响着HIBD后的机体神经组织功能自修复。本项目以HIBD机体的VA水平作为研究的始动因素，探讨VA水平是否影响神经功能自修复，且是否通过RA信号途径调节线粒体凋亡通路、抗凋亡信号来作用细胞凋亡水平实现。我们试图以此研究揭示一临床长期忽视的VAD现象，并深入探讨VAD对神经修复的损害作用及机制，为改善HIBD预后开辟一新方向和手段，对修复机制提供新的科学信息

为了探讨体内维生素A(vitamin A, VA)水平对缺氧缺血脑损伤(hypoxic-ischemic brain damage, HIBD)大鼠神经结局的影响。我们运用大鼠的VA营养控制模型叠加HIBD复合动物模型，原代神经元缺氧缺糖损伤（oxygen-glucose deprivation, OGD）体外模型。采用了HPLC，PCR，western-blot，流式细胞技术，免疫荧光，基因过表达及沉默技术，钙影像，神经功能评估方法等技术。研究了不同VA水平对神经功能结局的影响，并探讨了损伤急性期细胞凋亡程度的不同，进一步研究了线粒体凋亡通路信号的影响。.最终我们首次揭示了临床中常常忽略的一个可能病损因素：即HIBD损伤后的持续VA缺乏。我们通过体内实验发现并证明HIBD损伤后体内VA水平正常组神经功能结局要优于VA水平缺乏。且这种神经功能的促进可能是影响了损伤后急性期的细胞凋亡。进而体外实验发现并证明VA的体内活性代谢物ATRA通过其RARɑ受体信号途径调节线粒体凋亡和抗凋亡通路。进一步我们在体外实验发现并证明RA信号通过激活P13K信号通路，提高bcl-2\bak比例，抑制caspase-8通路，最后抑制细胞凋亡。并且我们发现这种抗凋亡效应有个适宜的RA信号丰度。最后我们在体内实验中又回证了体外的类似发现。.在本青年自然科学基金项目下，我们已发表两篇SCI论文，影响因子分别为4.21, 3.327，且现有一篇最重要的文章正在发表中。并且已资助培养硕士研究生两位（俞琴 2010级，陈龙2011级），正在培养硕士研究生一位（郭敏 2012级）。