甘麦大枣汤联合间充质干细胞在抑郁症治疗中的效应研究

The pathological mechanisms underlie depressive disorder (DD) is comprehensive, which is associated with nervous-immune-endocrine systems interaction disorder. Conventional anti-depressants based on the regulation of monoamine neurotransmitters has shown certain limitations. Ganmai Dazao Decoction (GMDZD) possesses the ability to regulate monoamine neurotransmitters and cortical hormone levels, has been proved presenting the auxiliary efficacy in DD treatment. Mesenchymal stem cells (MSC) can induce neurogenesis and immune regulation might be a potential effective approach for DD. Pilot study showed that GMDZD combined with MSC therapy can remarkably improve the clinical therapeutic efficacy in antidepressant treatment, probably through the complementary and synergistic effects. In current study, the acute and chronic stress induced mouse depression models were employed to verify the therapeutic efficacy of GMDZD combined with MSC therapy in DD treatment, to clarify the synergistic effects of GMDZD on MSC neurogenesis and immune regulation, or the complementary effects of GMDZD and MSC, and to elucidate the underlying mechanisms. The findings can provide evidence for the further application of traditional Chinese medicine combined with stem cell in antidepressant therapy, and offer a paradigm for reasonable composition of traditional Chinese medicine or combination with other therapeutic approach in antidepressant research.

抑郁症（DD）病理机制复杂，涉及神经—免疫—内分泌多系统相互作用功能紊乱。针对单胺类神经递质失衡的经典抗抑郁治疗方式有较大的局限性。甘麦大枣汤（GMDZD）可调控脑内单胺类递质和皮质激素水平，在DD治疗中有明确的辅助效应。间充质干细胞（MSC）可促进神经元再生及调控免疫是治疗DD的潜在有效方式。申请人前期临床前研究发现GMDZD联合MSC在DD治疗中有明显的疗效优势，其作用可能与GMDZD与MSC发挥协同互补效应有关。本课题通过急、慢性小鼠DD模型，验证GMDZD联合MSC抗抑郁的效应与优势，明确GMDZD抗抑郁的有效成分，探明GMDZD及效应成分对MSC向神经元诱导分化和对免疫调控的协同作用或对MSC的效应互补作用以及潜在的作用机制。为中药联合干细胞在DD治疗中的应用与推广提供理论依据，也为中药如何合理配伍与联合用药治疗DD的研究提供借鉴。

甘麦大枣汤（GMZ）是抗抑郁治疗的经典名方，临床常加味或配伍其他方剂使用，药简效宏，但其抗抑郁作用的效应机制尚未阐明。间充质干细胞（MSC）具有广泛的免疫调控作用，成为包括抑郁症在内的多种难愈性神经免疫疾病的潜在治疗手段。本课题基于前期基础和临床研究提出假说：GMZ和MSC联用可分别从调控肠道菌群和神经免疫炎症两个方面发挥抗抑郁的作用。主要研究发现包括：1）GMZ和MSC联合治疗可有效改善CUMS小鼠慢性抑郁症模型的特征性指标，且联合治疗的效果优于氟西汀（Flx）；2）GMZ可有效缓解LPS诱导的小鼠急性抑郁症模型，调控中枢及外周免疫炎性细胞因子水平是其改善急性抑郁症的主要作用机制；3）GMZ水煎液经HPLC-ESI-MS共鉴定出30个化学成分，包括16个黄酮类成分、11个三萜类成分和3个生物碱类成分，其中入血7个成分、入脑3个成分；4）基于肠道菌群测序分析显示CUMS小鼠存在明显的肠道菌群紊乱，主要表现为门水平Firmicutes和Bacteroidetes、属水平Barnesiella、Bacteroides及Anaerobacterium的相对丰度发生明显改变；KEGG分析提示，肠道菌群变化可能与包括谷氨酸能突触在内的多种代谢通路有关；5）通过CUMS小鼠来源的粪菌移植可致空白小鼠引发抑郁症状，提示肠道菌群紊乱可诱发抑郁症状；6）GMZ通过改善CUMS小鼠肠道菌群紊乱发挥抗抑郁作用，并通过移植经GMZ治疗的粪菌得到验证；7）菌-肠-脑轴的调控机制涉及短链脂肪酸水平、肠道屏障完整性、肠道局部免疫炎症状态、谷氨酸代谢异常等多个方面；8）MSC可有效抑制CUMS抑郁模型中中枢IL-1β、IL-6的水平；9）MSC通过分泌TGF-β1提高小胶质细胞Arg1的表达，抑制小胶质细胞M1型激活发挥中枢神经免疫调控作用，并通过干预TGF-β1通路得到验证。.以上研究阐明GMZ和MSC联用可分别从调控肠道菌群和神经免疫炎症两个方面发挥抗抑郁的功效且治疗效果优于Flx。本研究明确了中药复方联合MSC抗抑郁治疗的优势作用及其潜在的作用机制，为临床探寻新型抗抑郁疗法和药物靶点提供思路。