慢性胰腺炎相关miR-199a和miR-29鉴定及其靶向功能调控研究

胰腺纤维化是慢性胰腺炎主要病理改变，与胰腺星形细胞（PSC）活化密切相关，TGF-β是PSC最主要的活化因子之一。靶向调节微小RNA（miRNA）及其下游通路是胰腺纤维化转录后调控新手段。现有研究发现miR-199a和miR-29作用TGF-β相关通路影响肝纤维化程度，且两种miRNA与心脏、皮肤等组织纤维化密切相关，胰腺内未见报道。胰腺与肝纤维化存在许多相似性，前期工作发现，慢性胰腺炎患者血清和组织miR-199a表达较正常对照显著上调，而miR-29表达显著下调。本研究利用腺病毒载体等技术，旨在鉴定miR-199a和miR-29表达对PSC的影响，并对它们共同作用的TGF-β及其下游信号通路进行研究。上调动物模型体内miR-29或/和封闭miR-199a表达，观察对PSC活化和胰腺纤维化的抑制作用，检测TGF-β及其下游信号通路基因、蛋白表达变化，为慢性胰腺炎基因治疗提供新思路。

胰腺纤维化是慢性胰腺炎主要病理改变,与胰腺星形细胞(PSC)活化密切相关，TGF-β是PSC最主要的活化因子之一。而靶向调节miRNA是转录后调控新手段。通过芯片我们筛选并获得miR-199a和miR-29作用于TGF-β影响胰腺纤维化。虽然已有文献报道它们可能在心脏、皮肤等组织纤维化相关，但胰腺内未见报道。本课题首次发现并在细胞水平验证这两个miRNA参与TGF-β信号影响PSC细胞外基质蛋白的合成。同时将腺病毒转染过表达miR-29或者封闭miR-199a表达可改善大鼠模型中胰腺纤维化进程，且封闭miR-199a更为明显。为探讨其作用机制，通过表达谱芯片和双荧光素酶报告基因检测系统鉴定了miR-199a下游三个重要靶基因mTOR，SIRT1和HGF。本课题的研究拓展了miRNA调控胰腺纤维化的分子机制，为慢性胰腺炎基因治疗提供新的靶点和手段。