miR-199a通过靶向CD86和IL-6调控DC功能参与移植免疫耐受

We found that Flt3L combined with Rapa significantly prolonged murine cardiac allograft survival time and induced the generation of immature DCs.Imature DC plays an important role in the protective effect on cardiac allograft survival. However, the exact molecular mechanisms remain to be investigated.With the help of information analysis,we found that miR-199a can induce T cells anergy though regulating the expression of CD86 and IL-6 by directly targeting CD86 and IL-6. Furthermore,the low expression of CD86 on DC will inhibit the production of IL-6 via inhibition of PI3K/Akt-FoxO3a and PI3K/Akt-NF-κB phthway,and further inhibit the activation of T cells.In This project, allogeneic organ transplantation has been employed as a study model to discuss the regulation roles that the miRNA199a modulated the DCs differentiation and function by directly targeting CD86 and IL-6. Revealing this novel mechanism of miRNA199a in the organ transplant provide the experiment foundation that this mechanism to be a target for therapeutic intervention against allograft rejection.

申报者前期研究发现：联合应用酪氨酸激酶3配体及雷帕霉素可提高未成熟树突状细胞（DC）比例，并延长心脏移植物存活,未成熟DC对心脏移植物的存活具有保护作用,但其机制尚不清楚。借助信息学分析，发现miR-199a可直接靶向结合CD86和IL-6，从而抑制CD86（成熟DC的主要功能标志）和炎性因子IL-6的表达，导致T细胞失能；另外，CD86表达降低可抑制PI3K/Akt-FoxO3a和PI3K/Akt-NF-κB信号途径从而抑制炎性因子IL-6的产生，进一步抑制T细胞的激活。本项目拟建立体外细胞模型及同种异体小鼠心脏移植模型，通过诱导不同成熟状态的DC，观察miRNA199a表达的变化，以及miRNA199a对DC表面CD86表达和IL-6分泌的影响，探讨miR-199a通过直接靶向CD86和IL-6而影响DC功能并参与诱导移植耐受的作用及其机制。为探索干预移植排斥的新策略提供实验依据。

树突状细胞(DC)是免疫系统的重要组成部分，作为抗原提呈细胞能够激活适应性免疫。成熟的树突状细胞促进免疫应答，而不成熟的树突状细胞能够通过下调T细胞应答从而诱导或维持免疫耐受。因此，树突状细胞是免疫系统中最有效的抗原(Ag)提呈细胞。microRNA是一种非编码RNA，在转录后通过结合这些分子的3’- 非编码区域 (UTR)，调节其表达来调控mRNA。最近的许多研究表明，microRNA在树突状细胞成熟和分化过程中可能发挥作用，但其确切机制尚不清楚。miR-199a-3p如何以及是否影响DC成熟尚未被研究。本研究，我们发现miR-199a-3p水平与DC成熟,炎性细胞因子分泌和PI3K/AKT/NF-κB信号通路有关。此外，我们还分析了树突状细胞对调节性T细胞的刺激作用。通过这项工作，我们确定了miR-199a-3p靶向CD86，从而将其与DC成熟联系起来。因此，miR-199a-3p可通过靶向3 '-UTR 直接抑制CD86表达，从而延长小鼠心脏移植模型的同种异体移植物存活率。因此，miR-199a-3p过表达可能成为器官移植或自身免疫性疾病患者潜在的治疗策略。