扶正解毒祛瘀法联合蛋白敲除技术降解ErbB家族的抗胃癌作用及其机制研究

The molecular target therapy such as Trastuzumab was become the novel therapy against gastric cancer. However, it is urgent to elucidate the mechanism of the drug resistance and improve its clinical efficacy. According to our previously study, the“Fu-zheng Jie-du Qu-yu” therapies can inhibit the proliferation of gastric cancer cell line NCI-N87，inhibit the growth of breast cancer, lung cancer, and enhance the chemotherapy sensitivity. Also, we found that the engineered F-TrCP-Shc E3 ligase can effectively degrade ErbB RTKs in ErbB overexpression breast cancer cell line, which led to inhibition of proliferation, sensitized breast cancer cells to cytotoxic killing and decreased their transforming ability. The aim of this study is to explore the anti-gastric cancer mechanism of Fu-zheng Jie-du Qu-yu therapies and the ErbB protein degradation, identify the enhanced cytotoxicity in response to chemotherapy, target therapy in the gastric cancer cell and nude mice model, and evaluate the potential role of pan-ErbB suppression as a feasible strategy for the development of the next generation of targeted therapies against ErbB-positive tumors.

近年来，以赫赛汀（特异性结合ErbB2）为代表的分子靶向治疗成为胃癌治疗的新兴手段，而如何延缓、克服耐药是临床亟待解决的问题。本项目前期研究证实“扶正解毒祛瘀法”对乳腺癌、肺癌等肿瘤有抑制作用，可逆转肺癌细胞顺铂耐药，联合化疗具有减毒增效功能；其含药血清可抑制胃癌细胞系NCI-N87增殖。同时，本项目组通过“蛋白敲除”技术（通过调控SCF泛素-蛋白水解酶的底物特异性控制细胞内蛋白降解）降解ErbB过表达乳腺癌细胞内ErbB 家族，可抑制乳腺癌细胞增殖、促进凋亡、增强其化疗敏感性。本研究拟在细胞及动物模型中，探讨“扶正解毒祛瘀法”、“蛋白敲除技术”降解ErbB家族的抗胃癌机制，阐明两者联合化疗、靶向治疗的减毒增效、逆转耐药的作用机理。本研究以“扶正解毒祛瘀法”、“蛋白敲除技术”降解ErbB家族协同作用为切入点，旨在为延缓、克服靶向耐药，开发针对ErbB家族的新型抗肿瘤靶向药物提供理论基础。

以曲妥珠单抗为代表的分子靶向治疗成为ErbB2过表达胃癌治疗的新兴手段，而如何延缓、克服耐药是临床亟待解决的问题。课题组前期研究证实“扶正解毒祛瘀法”对乳腺癌、肺癌等实体肿瘤有显著抑制作用，可逆转肺癌细胞的顺铂耐药性，且联合化疗具有减毒增效功能；另外，课题组前期通过“蛋白敲除”技术（通过调控SCF泛素-蛋白水解酶的底物特异性控制细胞内蛋白降解）成功降解ErbB过表达乳腺癌细胞内ErbB家族，从而有效抑制乳腺癌细胞增殖、促进凋亡、增强其化疗敏感性。基于此，本研究拟在细胞及动物模型中，探讨“扶正解毒祛瘀法”、“蛋白敲除技术”降解ErbB家族的抗胃癌作用及其机制，阐明两者联合化疗、靶向治疗的减毒增效、逆转耐药的作用机理。.通过研究，结果显示：①“扶正解毒祛瘀法”联合“蛋白敲除技术”降解ErbB家族能抑制ErbB信号通路传导，能够显著抑制ErbB2过表达胃癌细胞系NCI-N87细胞的细胞增殖、迁移、侵袭等生物学行为，从而起到抗胃癌作用；②通过NCI-N87细胞学实验及胃癌裸鼠移植瘤模型中研究，我们发现“扶正解毒祛瘀法”联合“蛋白敲除技术”降解ErbB家族，能够抑制胃癌肿瘤细胞的克隆发生及裸鼠移植瘤的生长；③通过细胞、动物模型，我们明确了“扶正解毒祛瘀法”联合“蛋白敲除技术”能够增强ErbB2过表达胃癌细胞株NCI-N87对化疗（顺铂）、靶向治疗（曲妥珠单抗）的杀伤敏感性，动物实验发现其与化疗、靶向治疗具有协同作用。.综上所述，通过本研究，初步明确了“扶正解毒祛瘀法”联合“蛋白敲除技术”降解ErbB家族的抗胃癌作用和机制，为开发靶向ErbB家族的抗肿瘤靶向药物提供了理论基础，为进一步探索二者与化疗、靶向治疗联合应用于ErbB2过表达胃癌的可行性提供实验证据，为胃癌中西医结合综合治疗策略的制定提供了理论依据。