基于tankyrase调控WNT通路探讨扶正祛瘀解毒法联合XAV939抑制肺腺癌发生发展的作用机制研究

Tankyrases keep telomeres at a specific length,to ensuring the continuous growth and reproduction of tumor cells. Previous studies have found that TNKS can regulate the abnormal activation of Wnt/ beta -catenin pathway in lung adenocarcinoma.This study takes tankyrase as the breakthrough point. We used in vitro experiment and in vivo animal model. To explore the relationship between TNKS and Xiaoyan Decoction and its mechanism of inhibiting the activation of Wnt/ beta -catenin pathway.Based on the above ideas, to analyze the effect and possible molecular mechanism of Chinese herbal medicine Xiaoyan Decoction combined with TNKS small molecule inhibitor in the treatment of lung adenocarcinoma by regulating WNT pathway.To explore the best therapeutic effect of the decoction alone or in combination.The role of beta-catenin and downstream target genes in the WNT signaling pathway was analyzed. In order to further study the possibility of combining traditional Chinese and Western medicine treatment of lung adenocarcinoma.

端锚聚合酶（Tankyrases，TNKS）使端粒维持在一特定长度，保证肿瘤细胞持续生长繁殖。前期研究发现在肺腺癌中TNKS可调控Wnt/β-catenin通路异常激活。本研究以tankyrase为切入点，采用体外细胞实验及体内动物模型模式，探讨消岩汤与TNKS的相互作用关系及其抑制Wnt/β-catenin通路激活的具体机制。基于上述思路，分析中药消岩汤联合TNKS小分子抑制剂通过调控WNT通路治疗肺腺癌的实验效果及可能的分子机制。探讨消岩汤单独或联合靶向治疗何种方式疗效最佳，分析其对WNT信号转导通路关键调控蛋白β-catenin和下游靶基因的作用，从而深入研究中西医结合治疗肺腺癌的可能性。

端锚聚合酶（Tankyrases，TNKS）使端粒维持在一特定长度，保证肿瘤细胞持续生长繁殖。前期研究发现在肺腺癌中TNKS可调控Wnt/β-catenin通路异常激活。本研究以tankyrase为切入点，采用体外细胞实验及体内动物模型模式，分析中药消岩汤联合TNKS小分子抑制剂通过调控WNT通路治疗肺腺癌的实验效果，探讨消岩汤与TNKS的相互作用关系及其抑制Wnt/β-catenin通路激活的具体机制。首先，通过研究TNKS与临床病理特征之间的关系发现TNKS在肺腺癌组织中高表达。TNKS高表达与肿瘤体积大小、TNM分期晚期密切相关。其次，TNKS的生物学功能显示，TNKS的减少抑制了A549和H1975细胞的生长和增殖，降低了A549和H1975细胞的迁移和侵袭。TNKS过表达可促进体外肺腺癌细胞的生长和增殖，增强了肺腺癌细胞的迁移和侵袭能力。这些结果表明TNKS可能成为治疗肺腺癌的新靶点。再次，研究证实消岩汤及小分子抑制剂E7449在体内外均具有抑制A549肺腺癌细胞增殖、抑制细胞迁移和转移的生物学特性。且两者结合使用更有效。E7449和消岩汤均能明显抑制小鼠体内肺腺癌细胞皮下肿瘤的形成。进一步Laber-free蛋白质组学结果提示，消岩汤和TNKS抑制剂经WNT通路抑制肿瘤的发生，E7449组调控的大部分蛋白与经典Wnt/β-catenin信号通路相关，而消岩汤组涉及调控的大部分蛋白与Wnt/PLAN信号通路相关。并应用WB对蛋白组学结果进行了验证。消岩汤和TNKS抑制剂通过抑制Wnt通路，下游靶蛋白c-myc的表达进一步下调，通过调控凋亡相关蛋白Bcl-2和caspase-3促进细胞凋亡。将中草药与TNKS小分子抑制剂靶向治疗相结合，是我们研究的重要创新和特色。联合应用消岩汤和TNKS抑制剂协同抑制WNT通路，特异性靶向治疗肺腺癌，为肿瘤治疗开辟新途径。