DDC、DRD2/3及DAT遗传多态性分析及其影响左旋多巴效应的机制研究

左旋多巴是治疗帕金森病最常用的药物，其临床疗效及不良反应均存在显著个体差异。DDC、DRD2/3及DAT为多巴胺通路的关键分子，但目前对其遗传变异及其在药物反应差异中的作用尚未明确。本项目拟采用PCR-Pyrosequencing方法系统筛查DDC、DRD2/3、DAT基因突变，并建立适合大样本基因分型的方法，在群体水平分析健康汉人和帕金森病患者DDC、DRD2/3及DAT遗传多态性分布特征；构建稳定表达DDC、DRD2/3及DAT野生型和突变等位基因的HepG2/CHO/PC12细胞，在细胞水平研究各基因变异对相应蛋白生物学功能的影响；在人体水平，选取携带不同基因型的帕金森病患者，以UPDRS为指标，分析DDC、DRD2/3及DAT遗传变异对左旋多巴疗效和不良反应的影响。本课题旨在从群体、整体及分子水平阐明DDC、DRD2/3及DAT多态性在左旋多巴药物反应个体差异中的作用。

拟多巴胺类药物是治疗帕金森病最常用的药物，其临床疗效及不良反应均存在显著个体差异。遗传药理学研究表明，药物反应相关蛋白DR、DAT及COMT基因多态性是导致药物反应个体差异的重要原因，但如何应用基因组信息预测拟多巴胺药物剂量，国内外尚无报道。本项目系统检测上述蛋白编码基因的常见遗传多态性，建立适合大样本基因分型的方法，为获得药物反应差异相关蛋白的遗传信息建立平台；通过多个严格设计的前瞻性临床试验，分析患者临床疗效和不良反应与上述遗传多态性的关系，系统认识多巴胺通路个体差异的分子机制，提供可供预测药物疗效的生物学指标，为帕金森病基因导向性个体化用药提供指导。.本项目根据立项时的试验设计和研究内容，进行了如下研究工作：.健康志愿者及帕金森病患者DNA标本库及病例库的建立：建立了200余名与帕金森病患者年龄匹配的血标本和DNA库；建立了500余例帕金森病患者标本库及病例库；.建立了对DR、DAT及CMOT突变检测方法。完成病例及对照样本基因突变筛查工作；.临床研究：本项目分析了DR、DAT及COMT基因12个单核苷酸多态性（Single nucleotide polymorphisms, SNPs）在中国汉族健康人群以及帕金森病患者中的分布特征；探讨其中DRD2 rs6275 (939C>T)和DAT rs27072 (-2703 T>C)遗传多态性是否影响帕金森病人多巴丝肼合用普拉克索的临床疗效，及DRD2 932C>G, rs6275 (939C>T),rs6277 (957C>T), DAT -2703 T>C, 1491A>C, 1215A>G六个SNPs位点与左旋多巴药物治疗诱导的运动并发症之间的关系。.该研究对优化拟多巴胺药的治疗方案、提高帕金森病治疗水平及改善患者疗效及生活质量有重要意义。