MTA1基因调节microRNA表达在肺癌侵袭转移中的作用及机制研究

我们前期研究表明，MTA1基因在肺癌中异常过表达，与癌细胞增殖、侵袭迁移及不良预后密切相关，是一个重要的肺癌相关基因，但其作用机制尚不清楚。最近，我们利用芯片技术首次筛选出受MTA1基因调节表达的miRNA，其中部分miRNA有文献显示与肿瘤的转移预后相关，由此，我们推测：MTA1促肺癌侵袭转移作用的机制可能通过其调节表达的miRNA来实现。本项目拟进一步以具有相同遗传背景的人肺癌高低转移细胞株95D和95C为研究对象，采用生物信息学、基因转染或RNA干扰、miRNA过表达或抑制、靶基因表达检测、细胞功能分析等技术方法，结合肺癌临床组织样本分析，从miRNA角度探讨MTA1基因在调控侵袭转移信号通路中的分子机制，获取MTA1通过miRNA调控肺癌转移的可靠证据。研究结果将为寻找防治肺癌侵袭转移新的干预靶点提供重要线索，并可望拓展对已知miRNA功能的认识。

MTA1基因在肺癌中异常过表达，与癌细胞增殖、侵袭迁移及不良预后密切相关，是一个重要的肺癌相关基因，但其作用机制尚不清楚。本研究通过体外体内实验观察了MTA1及其调节microRNA在肺癌中的作用及机制。结果发现：（1）MTA1基因沉默后共获得6个差异表达miRNA，包括表达被下调了的miR-125b和被上调了的miR-744；（2）miR-125b在肺癌细胞中发挥了抑癌基因的作用，而且抑制miR-125b能完全抵消MTA1沉默对肺癌细胞株侵袭、迁移能力的影响；（3）与正常支气管上皮细胞相比，miR-744在非小细胞肺癌细胞株中表达上调，在体内外培养中，miR-744能促进肺癌细胞的侵袭迁移和成瘤转移，并与转移相关基因MTA1形成正向反馈调控；（4）生物信息学预测提示驱动蛋白轻链2（KLC2）的3’UTR存在miR-125b和miR-744的结合位点。而且与癌旁组织相比，KLC2在肺癌组织中高表达，且与淋巴结转移、临床分期、病理分级呈负相关，在≥60岁肺癌人群中KLC2高表达的生存预后更差；在mRNA水平上，KLC2在肺癌细胞株中低表达，提示KLC2在肺癌中的表达存在转录后水平的调节。这些研究结果提供了MTA1通过miRNA调控肺癌侵袭迁移的可靠证据，为寻找防治肺癌侵袭转移新的干预靶点提供了重要线索，并拓展了对已知miRNA功能的认识。