microRNA在肺癌侵袭转移中的作用及γ射线影响研究

90%的癌症患者死于恶性肿瘤的侵袭转移，近来发现microRNA作为一类非编码微小RNA，广泛参与了对恶性肿瘤发生发展的调节。本项目在我们前期工作基础上，在体内、外较为系统研究miR-130a、miR-25对人肺腺癌A549细胞侵袭转移能力影响及其作用机制；分析游离或循环的miR-130a、miR-25作为独立的判断肺癌侵袭转移的生物标记物的可行性；在此基础上探讨γ射线照射对A549细胞miR-130a、miR-25表达及侵袭转移能力影响及其机制，为肺癌侵袭转移发生机制的深入研究和miR-130a、miR-25在肺癌诊断治疗中的潜在应用提供实验依据。

90%的肿瘤患者死于肿瘤的侵袭转移，放射治疗是恶性肿瘤的主要治疗手段之一，但一定剂量的放疗可能对肿瘤细胞具有兴奋效应。miRNA是转录后调控mRNA表达的非编码微小RNA，具有高度的保守性和组织特异性，在发育、生长、死亡等生命过程中都发挥着重要作用，且在不同肿瘤中具有特定的表达模式，其表达谱可反映肿瘤的组织来源及分化状态。研究显示具有广泛生物学活性、并与肿瘤的发生、发展及侵袭转移密切相关的miRNA参与辐射诱导的生物学反应过程、且与辐射诱发的细胞生物学功能改变、辐射诱导的肿瘤的发生及辐射旁观者效应均有着密切的关系。本研究前期工作亦发现2 与4 Gy X 射线可以促进A549细胞的体外侵袭转移能力，为了深入研究miRNA在射线诱导的A549细胞侵袭转移能力改变中的作用机制，我们首先开展了不同剂量射线对A549细胞体内外侵袭转移能力影响机制的研究；其次，筛选不同剂量X射线诱导的A549细胞侵袭转移能力改变过程中差异表达的miRNAs，并在体内、外及临床肺癌组织与肺癌患者血清样本中进行验证，为miRNA在肺癌转移诊断、治疗中的应用提供实验依据；第三，选取几种miRNAs进一步研究不同剂量射线对其表达影响及其在射线诱导的A549细胞侵袭转移能力改变中的作用机制并对miR-424-5p调控的信号通路进行了研究。结果证实2Gy及4Gy X射线照射通过上调A549细胞VEGF-A/C及CCR-7mRNA的表达促进A549细胞的体内外、侵袭转移；miR-130a、miR-25与miR-191*在mRNA水平上上调VEGF及CCR-7的表达；miR-424-5p通过上调SOCS3的表达上调STAT3/MMP2信号通路活性，最终促进A549细胞侵袭转移；miRNA pattern（miR-424, miR-424*，let-7i，let-7i*，miR-505，miR-505*，miR-191*，miR-423-5p，miR-130a and miR-25）有可能作为肺癌临床诊断及预后判断的潜在生物标记物。本研究为肺癌的诊断及治疗提供了理论与实验依据，具有良好的应用前景与临床价值。