PARP调控NF-κB通路参与重症急性胰腺炎肾上腺损伤的机制研究

重症急性胰腺炎（SAP）病情凶险，常发生多器官功能障碍。研究显示SAP病情恶化与肾上腺损伤相关，其机制仍未明确。聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）与脓毒症、胰腺炎等并发多器官功能障碍的病理过程密切相关，目前阻断PARP活性在防治SAP合并肾上腺损伤中的作用所知甚少。本组前期研究证实：SAP时出现肾上腺损伤，PARP过激活亦参与其损伤过程，且应用PARP抑制剂3-AB有助于减轻SAP病情。本项目拟从体内、外实验，利用免疫荧光、EMSA、western blot、流式检测等技术，观察PARP过活化对NF-κB依赖基因/蛋白表达的影响，采用基因沉默和过表达PARP-1技术，证实PARP过活化可激活NF-κB信号转导通路，使得炎症级联反应扩大，影响肾上腺皮质细胞的结构和功能，从而导致肾上腺损伤。本项目旨在为SAP合并肾上腺损伤的发病机制及防治提供理论基础和实验依据。

重症急性胰腺炎（SAP）病情凶险，常发生多器官功能障碍。研究显示SAP病情恶化与肾上腺损伤相关，其机制仍未明确。聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）与脓毒症、胰腺炎等并发多器官功能障碍的病理过程密切相关，但阻断PARP活性在防治SAP合并肾上腺损伤中的作用所知甚少。本课题通过成功建立牛磺胆酸钠诱导的SAP大鼠模型，利用血清酶学、免疫组化、免疫荧光、透射电镜、TUNEL、ELISA，western blot、流式检测等实验技术，观察并评价了胰腺炎严重程度指标，肾上腺组织功能及结构变化，超微结构变化，氧化应激水平，血清炎症细胞因子及NF-κB信号通路相关蛋白的表达水平，了解了PARP过活化对NF-κB依赖基因/蛋白表达的影响，证实SAP时出现肾上腺结构和功能损伤，且PARP过激活参与了损伤过程；确定PARP抑制剂3-AB的最佳量效关系，并应用该药物作用于大鼠模型，证实其有助于减轻SAP病情，并能减轻大鼠肾上腺结构和功能的损伤，降低氧化应激水平及炎性因子、NF-κB相关蛋白表达；通过成功培养大鼠肾上腺皮质细胞，采用基因沉默和过表达PARP-1技术，进一步证实PARP过活化可激活NF-κB信号转导通路，使得炎症级联反应扩大，影响肾上腺皮质细胞的结构和功能，从而导致肾上腺损伤。为SAP合并肾上腺损伤的发病机制及防治提供理论基础和实验依据。