CXCL17对肝细胞癌发生发展及血管形成的调控作用与机制

Chemokines play an important role in the tumor microenvironment. We recently observed that the chemokine (C-X-C motif) ligand 17 (CXCL17) was closely related to the prognosis in patients with hepatocellular carcinoma (HCC). Our preliminary results showed that CXCL17 expressed in the HCC tissue was significantly higher than in hepatitis tissue. CXCL17 was expressed by neutrophils, liver cells, and other immune cells (mainly neutrophils). The expression of CXCL17 in neutrophils was up-regulated when joining HMGB1. We also found a positive correlation between the intracellular percentages of CD68 and CXCL17. We inferred that CXCL17 expression in tumor-associated neutrophils (TANs) may have a regulatory effect on liver cancer cells. On this basis, this project intends to analyze the regulatory effect of TANs expressing CXCL17 on liver cancer cells and tumor-associated macrophage, the regulatory mechanism of HMGB1 on CXCL17 expression in TANs, and the effect and mechanism of CXCL17 on angiogenesis in HCC in vitro models; then verify the relevant mechanisms in clinical samples; finally, we study the impact of blocking this passage on the formation and metastasis of HCC in a mouse model. The results will illustrate the regulatory effect and mechanisms of CXCL17 on development and metastasis of HCC, which will provide a theoretical basis on inhibiting the development and metastasis of HCC through intervention CXCL17.

趋化因子在肿瘤微环境中发挥重要作用。我们新近在肝细胞癌中观察到趋化因子CXCL17与肝癌病人预后密切相关。前期结果发现：CXCL17在肝癌组织表达明显高于肝炎组织，CXCL17由中性粒细胞、肝细胞及其他免疫细胞表达（主要为中性粒细胞），加入HMGB1可上调中性粒细胞CXCL17的表达，且CXCL17与巨噬细胞表达呈正相关。据此推测：肿瘤相关中性粒细胞（TAN）表达CXCL17可能对肝癌细胞有调控作用。以此为基础，本课题拟首先在体外模型中明确TAN表达CXCL17对肝癌细胞及肿瘤相关巨噬细胞的调控作用，HMGB1调控TAN表达CXCL17机制，以及CXCL17对肝癌血管形成的影响及机制；继而在临床样本中验证相关机制；最后在小鼠模型中探讨阻断该通路对肝癌形成和转移的影响。所得结果将初步阐明CXCL17对肝癌发展及转移的调控作用与机制，为通过干预CXCL17来抑制肝癌发展及转移提供理论基础。

趋化因子在肿瘤微环境中发挥重要作用，CXCL17对肝细胞癌（HCC）的临床意义和调节作用尚不可知。本课题首先在体外模型中明确了CXCL17对肝癌细胞及肿瘤相关巨噬细胞的调控作用，以及HMGB1调控TAN表达CXCL17的机制，以及CXCL17对肝癌血管内皮细胞的影响及其机制，进而研究CXCL17对HCC细胞自噬的影响及机制，最后在小鼠模型中探讨阻断该通路对肝癌形成的影响。我们观察到，CXCL17在HCC中表达增高，与肿瘤分期和预后相关。CXCL17表达的升高促进了增殖、侵袭和迁移，CXCL17增强TAM的趋化活性，促进TAM 分泌细胞因子，HMGB1 可使TSN处理过的中性粒细胞表达CXCL17增高，CXCL17可以促进肝癌血管内皮细胞表达MMP-2、MMP-9、VEGF、ICAM-1。CXCL17可降低LC-3B的生物合成和p62蛋白质减少。然而，CXCL17的沉默抑制了这些癌症表型的发展。此外，CXCL17沉默后可以刺激AMPK，这种刺激以及自噬刺激是由肝激酶B1（LKB1）引起的，其功能是由CXCL17沉默诱导的。此外，CXCL17沉默可增强LKB1的核转位。总之，这些发现表明HCC中CXCL17表达升高促进恶性细胞的恶性反应。我们的研究表明趋化因子CXCL17通过LKB1-AMPK途径加强恶性侵袭并抑制自噬。阐明CXCL17对肝癌发展及转移的调控作用与机制，为通过干预CXCL17来抑制肝癌发展及转移提供理论基础。. 炎症是肿瘤的标志之一，但是免疫细胞浸润的调控机制目前还不清楚。本研究阐明了CXCR2在HCC组织分布情况及其对HCC预后的影响。CXCR2+细胞大部分由中性粒细胞表达，且主要集中在HCC组织癌旁间质区域，Kaplan–Meier生存分析显示癌旁间质区域增加的CXCR2提示HCC不良预后。Cox比例风险模型分析显示癌旁间质CXCR2可以作为HCC独立预后因素。此外，我们发现在癌旁间质区域及癌巢组织内CD15+中性粒细胞密度与CXCL1水平呈正相关。联合CXCR2及CXCL1也是HCC不良预后的独立指标。我们的研究表明CXCR2+细胞密度可以作为判断HCC患者总体生存率的独立因素。CXCR2–CXCL1轴在调节HCC中性粒细胞浸润方面起重要作用，可能作为抗HCC治疗的靶标。