Beta-amyloid寡聚体特有的抗原表位多肽疫苗的研究

阿兹海默病（Alzheimer's Disease,AD）是由Beta-淀粉样蛋白单体分子（A-Beta）聚集形成具细胞毒性的寡聚物而引起的老年人的神经退行性疾病。几年前，由A-beta制成的疫苗疗效明显，但由于其严重的副作用而被宣告停止试验。可是，人们对AD治疗疫苗的研究从未停止,免疫治疗一直为AD研究领域的热点之一。为了克服原有疫苗的副作用，我们在国际上率先获得了特异抗A-beta寡聚体而不与单体结合的基因工程抗体，并且该类抗体能够明显降低寡聚物的细胞毒性及纤维状聚集（FEBS Lett,2009,583:579）。在此基础上，我们在国际上首次研究获得了A-beta单体中不存在的寡聚体特有的空间立体抗原表位。本项目拟应用该抗原表位肽连接载体蛋白作为免疫用抗原，选择合适的免疫佐剂，制备出能够减轻AD转基因动物症状和病理变化而又副作用小的多肽疫苗，从而为AD治疗提供具有较大应用潜力的制剂。

阿尔茨海默病（Alzheimer's Disease,AD）是由Beta-淀粉样蛋白单体分子（A-Beta）聚集形成具细胞毒性的寡聚物而引起的老年人的神经退行性疾病。A-Beta寡聚体是引起AD发生发展的主要因子，它可分为前纤维性寡聚体（PFO）和纤维性寡聚体（FO）。前者具有A-Beta单体和纤维所不具有的空间立体抗原表位。为了消除AD治疗疫苗的副作用，我们应用噬菌体显示技术，在国际上首次测定出寡聚物所特有的立体抗原表位。本项目应用该抗原表位肽连接蛋白载体作为免疫原，选择合适的佐剂，在国际上首次研究获得了寡聚体特有的空间立体抗原表位疫苗（PEOZ）。进一步的研究证明，该疫苗可明显提高AD转基因小鼠的记忆力，降低AD相关的病理变化，未发现副作用的发生，具有很好的应用前景。.（1）基于我们获得的寡聚体特异抗原表位肽，通过免疫试验及丙氨酸扫描试验，我们挑选出了较适宜的用于研制AD疫苗的表位；通过对几种疫苗佐剂的比较试验，我们最终选择了氢氧化铝作为疫苗的佐剂。.（2）应用制备的疫苗（PEOZ）对AD转基因动物治疗的试验结果表明，该疫苗可明显提高小鼠的空间定位记忆能力，减少脑内老年斑的数量和A-beta单体及寡聚体水平，降低脑内与炎症反应相关细胞如小胶质细胞、星形胶质细胞、T细胞的激活或浸润。.（3）应用该疫苗制备的抗体进一步验证了该疫苗的治疗效果。应用ThT荧光检测、透射电镜和MTT试验证实该抗体可以显著抑制A-beta及其他多种淀粉样蛋白的聚集及其细胞毒性。.（4）本项目任务计划书是研制应用前纤维性寡聚体（PFO）为免疫原的疫苗。在完成该项任务的基础上，我们应用已获得的纤维性寡聚体特异的抗原表位，还研究制备出了另一类寡聚体表位肽疫苗（PEOS），超额完成了预期任务。体内外的实验结果表明，该疫苗也具有显著的治疗作用，具有较好的临床应用前景。推测若将两种疫苗联合应用，可能会产生更好的治疗效果。.通过本项目的研究，我们成功获得了2类寡聚体特异性抗原表位疫苗；发表SCI论文7篇；申请国家专利5项，2项已获授权；培养博士生2名，硕士生10名，超额完成了项目设定的计划目标。依据本项目的研究结果，我们成功地申请获得国家重大新药创制项目的进一步支持，希望将该疫苗的研究尽早推到临床研究。该疫苗若能成功上市，将可缓解国家和家庭的沉重人力和经济负担，还将为我国的生物药物产业创造出巨额利润。