重组多表位流感病毒模拟表位抗原疫苗的实验研究

利用噬菌体表面展示技术筛选人流感病毒株H1N1、H2N2、H3N2的构象型模拟表位（mimotopes），通过体外实验（竞争抑制性酶联免疫实验、生物传感器亲和力分析等），鉴定上述不同亚型流感病毒模拟表位的生物学活性；采用重叠延伸PCR和DNA重组方法将所得到的不同亚型流感病毒模拟表位串联起来，构建重组基因表达载体，在大肠杆菌中表达多表位流感病毒模拟表位抗原融合蛋白，进行目标蛋白纯化和生物活性鉴定，并制备多表位模拟表位重组DNA疫苗。分别用多表位融合蛋白与多表位模拟表位DNA疫苗免疫Balb/c小鼠，用血球凝集抑制实验和噬斑形成抑制实验检测免疫动物血清中的保护性抗体水平，评价多表位流感病毒模拟表位抗原诱导产生针对上述三种不同亚型流感病毒的免疫保护作用，为解决流感病毒变异导致疫苗无效及进一步研制广谱的具有普遍保护力的流感疫苗提供实验依据。