Beclin 1不依赖的自噬发生的分子机理研究

自噬是细胞内的一种自分解代谢过程，包括大自噬，小自噬和分子伴侣介导的自噬。通常提到的自噬主要指的是大自噬。大自噬的特征是细胞质成分被包裹在自噬体内，然后自噬体与溶酶体融合，形成自噬溶酶体，从而被降解。根据自噬体形成是否依赖Beclin 1，自噬可以分为Beclin 1依赖的自噬和Beclin 1不依赖的自噬。关于Beclin 1依赖的自噬，其机制比较清楚。而关于Beclin 1不依赖的自噬的机制并不清楚，是目前自噬领域未阐明的重要问题。我们发现小分子化合物Z18造成HeLa细胞死亡的过程中出现了Beclin 1不依赖的自噬。关于Z18的前期研究已经投稿Autophagy杂志，并已经修回。这使得我们可以利用小分子探针Z18研究在肿瘤细胞内激活Beclin 1不依赖的自噬的分子机制，分析其中关键的蛋白间相互作用，以及其产生的自噬在细胞死亡过程中的作用机制。为肿瘤治疗提供合理的理论和实验依据。

自噬是细胞内的一种自分解代谢过程，包括大自噬，小自噬和分子伴侣介导的自噬。通常提到的自噬主要指的是大自噬。大自噬的特征是细胞质成分被包裹在自噬体内，然后自噬体与溶酶体融合，形成自噬溶酶体，从而被降解。根据自噬体形成是否依赖Beclin 1，自噬可以分为Beclin 1 依赖的自噬和Beclin 1 不依赖的自噬。关于Beclin 1 依赖的自噬，其机制比较清楚。而关于Beclin 1 不依赖的自噬的机制并不清楚。在本研究中，我们发现一个新的靶向Bcl-xL/Bcl-2蛋白的小分子化合物能够在HeLa细胞里诱导Beclin 1不依赖的自噬。抑制早期自噬，可以降低Z18诱导的细胞死亡；而抑制晚期自噬，可以促进Z18诱导的细胞死亡（Autophagy，2010，1032-1041）。我们利用RNA-Seq以及SILAC等技术，尝试从mRNA转录组以及蛋白质组角度研究Beclin 1不依赖的自噬发生的分子机制，相关工作还在进行中。另外，还尝试直接纯化细胞内自噬相关蛋白复合物，该部分工作并不顺利。在此期间，我们还发现p38参与到调控Beclin 1的自噬（ABBS，2012，815-822）。另外，建立了2种自噬相关的新检测方法（Analyst，2012，5571-5575；Autophagy，2012，1215-1226）。其中，利用串联荧光质粒mTagRFP-mWasabi-LC3检测自噬流的方法（Autophagy，2012，1215-1226）引起广泛关注，目前已经提供给国内外近40个课题组使用，已有使用该方法的研究论文发表。最近，我们关于p38调控自噬相关基因转录的研究论文被Autophagy杂志正式接收，即将发表。因此，在该基金的支持下，我们在Autophagy杂志上发表了3篇研究论文，开展了一系列自噬相关的研究。