种子类中药“逢子必炒”共性规律及特征性成分质量标准研究

The processing theory of “seed drugs be stir-heated before using” for the seed medicine has a rich scientific connotation. However, the internal chemical changes and changing law are not clear, the effective substances are not definite, and characteristic components quality standards are in need, so it is difficult to control the quality of the seed drugs effectively. When processing the Chinese herbal medicines, the same technical methods may cause some common reactions frequently. Previous studies have shown that some seed drugs occur decomposition reactions during processing, such as Semen Cassiae. In order to reveal the common mechanism of “seed drugs be stir-heated before using” in this further study and establish characteristic components quality standards, we will select four typically seed drugs, such as Arctii Fructus, and use the spectrum-activity relationship method to study the changes of the chemical composition and pharmacological effect, clarify the effective basis, and reveal common mechanism during the stir-frying process. Meanwhile, we will use pharmacokinetics method to clarify the effective substances in vivo of the four seed drugs. On this basis, multi-components by one marker, LC-MS and other methods will be employed to establish characteristic standards for these seed drugs, and then to guide the standardized production and clinical use of seed drugs.

种子类中药“逢子必炒”的炮制理论具有丰富的科学内涵，但在种子类中药炒制机理研究中，其炒制过程的内在变化过程和变化规律尚不清楚，药效物质不明确，且缺少特征性质量标准，难以有效控制质量。中药材在采用某种共性技术炮制过程中，常发生某种共性反应，有研究发现，白芥子等种子类中药炒制过程中发生了分解反应，本项目前期研究也发现了该现象。为了进一步研究揭示种子类中药“逢子必炒”共性规律，进而建立特征性成分质量标准，本项目选择牛蒡子等4味代表性种子类中药，采用谱效相关分析的研究方法，研究炒制过程化学成分及药效作用变化，阐明其药效物质基础，揭示炒制过程共性变化规律。同时，结合体内过程研究，阐明炒制过程对药效物质的影响，进而明确4味种子类中药的体内药效物质基础。在此基础上，采用一测多评技术和液质联用技术等方法，研究建立种子类中药特征性成分质量标准，指导种子类中药规范化生产和临床合理使用。

本研究旨在研究种子类中药“逢子必炒”的炮制机理，分别从炒制对决明子、苍耳子、酸枣仁和牛蒡子化学成分影响、炒制对决明子、苍耳子、酸枣仁和牛蒡子药效作用的影响以及炒制过程主要成分变化规律及谱效关系等方面入手，利用现代分析手段结合数理统计学方法，探究决明子、苍耳子、酸枣仁和牛蒡子炒制的科学内涵。. 通过比较决明子、苍耳子、酸枣仁和牛蒡子炒制前后成分变化，发现4种种子类中药炒制前后均发生显著的成分变化。利用HPLC方法建立决明子、苍耳子、酸枣仁和牛蒡子炒制前后的指纹图谱，对其进行PCA-X分析，发现决明子、苍耳子、酸枣仁和牛蒡子炒至前后能够明显聚成两类。继续利用UHPLC-Q-TOF-MS分析技术对决明子、苍耳子、酸枣仁和牛蒡子炮制前后的化学成分进行检测，同时进行主成分分析及t-检验，结果显示，决明子、苍耳子、酸枣仁和牛蒡子炒制前后在化学成分的组成上存在显著性差异，部分化学成分含量在炒制后上升，另有部分化学成分含量在炒制后下降。. 在确定炒制对其化学成分组成存在影响的基础上，采用基于灰色关联分析方法的谱-效相关研究手段筛选种子类中药的药效物质基础。实验设置不同组别，分别于给药后不同时间点采集血浆样品，采用酶联免疫试剂盒方法测定相关药效指标，建立各个药效指标的效应-时间曲线；同时利用UHPLC-Q-TOF-MS分析技术对其中化学成分进行检测。依据检测各成分的响应强度，建立各成分的响应强度-时间曲线，对各药效指标的效应-时间曲线与各成分的响应强度-时间曲线分别拟合，通过计算得到各成分与药效的相关度，再将体内代谢产物归属为原型化学成分，进行权重计算，得到相关系数，并进行排序，从而更加客观地反映化学成分与药效的动态发展关系。. 通过本项目研究，基本阐明了炒制对决明子、苍耳子、酸枣仁和牛蒡子化学成分的影响，炒制过程主要发生了分解反应和成分转化，导致成分含量改变。通过进一步的谱效关系研究，揭示了种子类中药炒制过程主要药效作用变化的物质基础，未建立针对性的质量标准奠定基础。