“樟帮”特色米泔水漂白术“减燥增效”机制研究

AMK rinsed in rice-washed water is Zhangband Feature Processing technic.To optimize the best processing technology for AMK. Using the contents of Atractylenolide I,Atractylenolide II,Atractylenolide III and Atractylon of AMK as indexes to study the effects of the rice-water ratio,rice-washed water content,soaking time and temperature by the cross tests method of four factors and three levels. Using gas chromatography, high-performance liquid chromatography to examine and comparative the Atractylodes lactone I , Atractylenolide Ⅱ, Atractylenolide Ⅲ, Atractylone content changes of optimal processing technology.We will establish the fingerprints of Atractylodes. By salivary amylase activity assays, anti-inflammatory experimental and gastrointestinal motility change, preliminary clarify the main pharmacological effect of AMK and rinsed ones.We will estabulish a LC-MS based method for ptysma ,urine , feces，serum metabolic fingerprinting analysis. The effect of AMK and rinsed ones will be evaluated.The correlation analysis of chemical compounds, pharmacological effect and metabonomics studies will be discussed to explain the possible mechanism of "reducing dryness and synergism" and the meaning of "drying" in TCM.

米泔水漂白术是樟帮特色炮制技术。本课题拟通过米水比、米泔水用量、浸泡时间、浸泡温度四因素三水平，以白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ及苍术酮含量为指标做正交设计初步筛选米泔水漂白术最优炮制工艺。采用气质联用、高效液相色谱法等现代分析技术比较米泔水漂白术、生白术及白术各炮制品中各类化学成分的变化，比较不同炮制品的饮片质量并建立指纹图谱。通过唾液淀粉酶活性实验、抗炎实验及胃肠道运动变化，比较白术炮制前后的药理作用。通过基于LC-MS技术平台的代谢组学评价方法，比较不同炮制品对实验动物的内源性小分子代谢物产生的影响，同时对炮制辅料米泔水进行化学成分、药效作用等多角度研究，通过对化学成分、药效学、代谢物水平进行关联分析，进行米泔水漂白术"减燥增效"的机制探讨，并对中医"燥性"科学内涵进行初步阐明。

米泔水漂白术为江西“樟帮”特色炮制品种，要含挥发油类(倍半萜类、芳香族化合物等)、内酯类、苷类等化学成分，可以增强白术健脾之力而减弱其燥性，但其具体的炮制工艺、炮制作用与评价尚不明确。本研究为探究米泔水漂白术的质量与其健脾作用的物质基础，以现代化学与药理研究手段开展系列研究：以UPLC-Q-TOF-MS/MS的化学计量学方法来分析不同产地白术的化学成分，结果表明浙江与其它产地的区别主要在于其中的16个差异性化合物，体现在白术内酯类、苍术酮、脱氢香橙烯等倍半萜类成分与酪氨酸，可以此来诠释白术的道地性内涵。采用星点设计-效应面法进行米泔水漂白术炮制工艺设计，并且采用HPLC法测定不同炮制条件下的白术内酯I、II、III，DesignExpert进行2次项回归拟合，预测最优条件为米泔水用量为9倍、漂洗时间55 h、漂洗温度26 ℃，在此条件下，工艺预测性良好。对小鼠的小肠推进与胃排空率的实验观察，探讨其健脾作用的初步机理，结果表明漂制后醇提液对小肠推进与胃排空能力增强，但生品未有明显变化。当作用于“湿阻中焦”大鼠，与模型组相比较，高剂量或低剂量组对MTL、GAS、TP、ALB、IgA、IgＧ等健脾指标上都显示了一定的差异，白术米泔水漂制对小鼠和大鼠都有一定的健脾作用。再以湿阻中焦证大鼠为研究对象，综合考查胃动素、胃泌素、免疫球蛋白IgA、免疫球蛋白IgG等指标变化，并进行胃的病理切片分析，探讨白术米泔水漂制前后的健脾作用及其机制。应用超高效液相色谱串联飞行时间质谱（UPLC-Q-TOF-MS/MS）技术结合化学计量学方法对米泔水漂白术与生品白术进行化学成分分析，鉴定出两者的差异性成分，来进一步说明米泔水漂白术中的化学成分对健脾作用的影响。鉴定共64个化合物，主要为倍半萜类、内酯类、氨基酸类等成分，同时共鉴定出生白术与米泔水漂白术的 7个差异性成分，主要集中于苍术酮、白术内酯I、白术内酯II、白术内酯III等这些含量相对较高的指标性成分。为米泔水漂白术的质量内涵研究评价提供科学依据。