长链非编码 RNA (LINC00461)/miR-9 对霍奇金淋巴瘤的调控作用及机制

Hodgkin Lymphoma (HL) derived from germinal center B cells, is one of the most frequent lymphomas in adolescents and young people whose pathogenesis is still unknown. Understanding the putative mechanism of this disease is urgently needed to develop new therapeutic interventions for the treatment of HL. Long non-coding RNAs (lncRNAs) are emerging as critical regulators in the progression of multiple tumors. However, the pathophysiologic significance of them in HL remains elusive. We hypothesize that the elevated expression of lncRNA (LINC00461) enhances the expression of miR-9 via functioning as its pri-miRNA, which in turn repress the downstream anti-oncogenes expression and subsequently result in inhibition of HL tumor cell growth. In this project, in vivo and in vitro studies were performed to (1) indentify the potential role of LINC00461 in HL tumor growth；(2) unravel the molecular mechanism of LINC00461 in the regulation of HL；(3) determine whether the LINC00461 could represent a novel biomarker and therapeutic target for initiation and progression of HL. This project will provide us a new insight into clinical anti-HL treatment.

霍奇金淋巴瘤 (Hodgkin Lymphoma，HL) 来源于生发中心 B 细胞，是青年人中最常见的恶性肿瘤之一，其发病机制尚不清楚。因此，寻找防治肿瘤的有效措施，是目前 HL 治疗亟待解决的问题。长链非编码 RNA (lncRNA) 在肿瘤发生发展过程中发挥重要的调控作用，然而在 HL 中仍未见报道。我们基于前期工作提出假设：在 HL 中上调的 lncRNA (LINC00461) 作为 miR-9 的初始 miRNA (pri-miRNA) 促进其表达，导致其下游抑癌基因下调，从而促进 HL 细胞生长及肿瘤形成。本课题拟从在体和离体水平深入研究 (1) LINC00461 对 HL 细胞生长和肿瘤形成的作用；(2) 揭示 LINC00461 调控 HL 的分子机制；(3) LINC00461 是否可以成为肿瘤发生发展的预警因子及治疗靶点。本研究将为临床 HL 的防治提供新思路。

霍奇金淋巴瘤是青年人中最常见的恶性肿瘤之一，尽管临床中对于早期患者治愈率较高，但对于早期预后不良以及晚期患者治疗效果仍不尽如人意。因此，系统探究参与霍奇金淋巴瘤进展新的分子调控机制，深入挖掘有效治疗新途径，对于降低发生率，延长患者寿命、提高生存质量，减轻家庭和社会负担，将具有重要的社会意义。本项目利用高通量测序筛选及qRT-PCR验证LncRNA-LINC00461与miR-9在霍奇金淋巴瘤细胞中表达均上调；体外细胞实验证实分别敲减LINC00461和miR-9均抑制霍奇金淋巴瘤细胞生长，促进细胞凋亡；LINC00461与miR-9来源于同一基因转录本，并且敲减LINC00461降低miR-9表达，进一步验证LINC00461作为miR-9的前体（pri-miRNA）影响霍奇金淋巴瘤的肿瘤进展；随后筛选并验证了miR-9直接调控靶基因BCL2L11和IGF2；而抑制靶基因BCL2L11或IGF2的表达能够部分逆转miR-9下调对肿瘤生长的抑制作用。本课题首次揭示了LINC00461通过作为miR-9的pri-miRNA发挥促进霍奇金淋巴瘤进展的新作用与新机制。此外，我们开展了抗肿瘤药物的筛选，发现褪黑素（Melatonin）具有抗霍奇金淋巴瘤肿瘤形成的作用。体外实验证实褪黑素能明显抑制霍奇金淋巴瘤细胞生长，促进细胞凋亡，触发细胞自噬；进一步实验结果显示褪黑素显著促进其膜受体MT2及核受体RORA、RORB、RORC表达，对膜受体MT1表达无影响，这其中对RORC的表达增高的最显著。本课题首次发现褪黑素通过促进RORC表达诱发自噬性细胞死亡，具有抗霍奇金淋巴瘤新作用。因此本项目所取得的发现加深了我们对霍奇金淋巴瘤发生机制的认识，为霍奇金淋巴瘤的防治提供新靶点和新策略，具有重要的科学意义和临床应用价值。