转录因子CREB调控的microRNAs在食管鳞癌侵袭转移中的作用与分子机制研究

当前研究表明肿瘤中的一些转录因子通过其靶miRNA调控基因的表达，形成"转录因子-miRNA-下游基因"的转导通路，促进肿瘤的增殖、侵袭转移。前期研究表明转录因子CREB在食管鳞癌组织、细胞中高表达，且与食管鳞癌细胞的增殖、侵袭相关；生物信息学分析表明CREB调控37条miRNA的表达，包括一些Oncomir。因此，本课题拟以在食管鳞鳞癌中过表达的CREB为线索，以CREB调控的miRNA为切入点，系统研究①CREB异常表达与食管癌恶性分化程度以及侵袭转移等恶性生物学特征的关系；②系统鉴定CREB调控的miRNA表达谱；③"CREB-miRNA-下游基因"通路在食管鳞癌增殖、侵袭转移中的作用；④阻断该通路与顺铂等化疗药物联合使用在食管癌治疗中的价值。有望发现新的与食管鳞癌增殖、侵袭转移密切相关的分子，完善食管鳞癌增殖、侵袭转移的分子机制，并为食管鳞癌的诊断和调控阻抑治疗提供新的策略和依据。

本项目按计划开展了研究工作，基本达到预期研究目标。.当前的研究表明，miRNA与肿瘤相关基因表达的调控密切相关，直接或间接参与肿瘤的发生、发展以及侵袭转移等过程。miRNA在调控肿瘤相关基因表达的同时，其自身的表达也受相应的转录因子的调控。本项目以在食管鳞癌中过表达的CREB为线索，以CREB调控的miRNA为切入点，系统深入的研究了以下科学问题：①研究确定了转录因子CREB在食管鳞癌组织中过表达，并且与食管鳞癌的TNM分期和淋巴结转移密切相关。基因沉默CREB可抑制食管鳞癌细胞增殖，使细胞阻滞于S期，诱导细胞凋亡，并且抑制食管鳞癌细胞的增殖与迁移。同时通过裸鼠皮下成瘤实验，在裸鼠体内进一步证实沉默CREB的表达可以显著抑制食管癌细胞增殖；②利用高通量测序的方法鉴定了食管癌细胞中CREB调控的miRNA表达谱，结合现有的生物医学成果和生物信息学分析的方法，推测let-7、miR-103和miR-10a等是CREB调控食管鳞癌侵袭转移的潜在靶microRNA；③建立了可实时监测的食管癌裸鼠侵袭转移模型，为后期验证 “CREB-miRNA”通路在食管鳞癌增殖、侵袭转移中的作用提供了便捷、可靠的监测平台；④通过细胞增殖以及凋亡实验检测发现，基因敲除CREB可以显著增强食管癌细胞对临床常用化疗药物顺铂的敏感性。总之，本项目的顺利开展，进一步丰富和完善了食管鳞癌增殖、侵袭转移的精细分子机制，并为食管鳞癌的诊断和调控阻抑治疗提供了新的策略和依据。