广西莪术SSR分子标记的开发及其在遗传多样性分析和育种中的应用

药用植物优良品种选育是提高人工栽培药材质量、实现中药资源可持续利用的根本有效途径，通常其药用成分含量是评判药材质量的决定性指标。广西莪术是广西主产的道地药材，是临床上较为常用的活血化瘀药物。其莪术油具有很好的抗肿瘤、抗血栓和抗病毒作用，年需求量巨大,产品供应国内外。但市场上非常缺乏药用成分含量高的品种和好的种质资源。因此，采用有效快捷的育种方法培育广西莪术优良品种，具有重要的理论和实践意义。. 本研究拟采用简单重复序列SSR，开发SSR标记。即利用公共数据库中姜黄属ESTs，通过系列分析工具，设计出更多的相对应的SSR引物（EST-SSR标记），以所收集到的102份莪术不同变异类型为材料，然后利用这些SSR引物进行广西莪术的遗传多样性分析和分子标记辅助育种。从中筛选出最有价值的优良种质，达到种质创新目的，以培育出更优良的广西莪术新品种。为广西莪术优良品种选育研究奠定理论和实践基础。

广西莪术是广西主产的地道药材，是临床上较为常用的活血化瘀药物。其莪术油具有很好的抗肿瘤、抗血栓和抗病毒作用，需求量巨大。但市场上非常缺乏药用成分含量高的品种和好的种质资源。因此，采用有效快捷的育种方法培育广西莪术优良品种，具有重要的理论和实践意义。本研究首先考查了102份广西莪术资源材料的植物形态、药材性状及挥发油中的有效成分，通过比较评价和聚类分析，将其分为高产、高油、既高产又高油、其它四大类；同时，根据Genbank/dbEST公共数据库中姜黄属的ESTs，利用软件SSRfinder分析了姜黄属935条含SSR的单一基因序列，采用Primer5. 0设计出325对SSR引物，合成引物125对。并从125对引物中筛选出扩增条带更清晰、重复性好、多态性高的引物48对；摸索出一套适合广西莪术基因组DNA的提取方法，建立了SSR-PCR优化反应体系；利用筛选得到48对多态性SSR引物对94份广西莪术资源材料进行了遗传多样性分析；随后，根据每份材料的标记分析结果，结合其形态特征和药用成分含量的数据，分别获得与广西莪术单株药材产量、莪术酮含量和莪术醇含量显著相关的SSR标记；进一步利用分子标记选择培育含有优良性状的广西莪术新品系6个。这些工作的完成不仅为广西莪术研究开创了新的方法和技术手段，还为广西莪术新品系选育提供了优良的材料，也为广西莪术优良品种选育研究奠定理论和实践基础。