骨髓来源细胞通过融合参与肺癌细胞EMT在肺癌转移机制中的作用研究

上皮细胞间质转型（Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT）被认为是引起肺癌转移的早期关键事件，而肺癌细胞发生EMT的机制目前并不完全清楚。结合文献和既往的工作我们提出BMDC与肺癌细胞融合可能参与了肺癌细胞EMT的发生的假说。为验证推测，拟用β-gal转基因小鼠的BMDC重建Cre重组酶转基因小鼠骨髓，利用化学诱癌剂诱发骨髓重建的Cre小鼠肺癌形成，以便用EGFP示踪融合细胞，免疫组化和免疫荧光观察原发肺癌中EGFP的表达情况；原发肺癌原位移植到裸鼠，观测转移灶中有无EGFP阳性细胞群；利用流式细胞仪细胞分选技术将原发肺癌细胞分为EGFP＋和EGFP－组，分别比较其形态和体内转移活性，RT-PCR、Western Blot等分别检测其EMT相关分子和蛋白的表达差异。以验证BMDC通过融合参与EMT是肺癌转移的机制之一，为阐明肿瘤转移机制提供新的线索。

上皮细胞间质转型（Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT）被认为是引起肺癌转移的早期关键事件。为了构建远处转移灶，播散的肺癌细胞需要同时具备自我更新能力。而其机制目前并不完全清楚。融合可能为一种潜在机制，即肺癌细胞通过与骨髓来源细胞融合可能使肺癌细胞发生EMT并获得干细胞特性。本项目中，我们发现肺癌细胞与骨髓来源间充质干细胞通过融合产生的杂交瘤细胞同时具备EMT及干细胞特性。杂交瘤细胞失去了上皮细胞形态，呈梭形，并且vimentin、α-smooth muscle actin (α-SMA)、及fibronectin表达上调而E-cadherin和pancytokeratin表达下调同时伴随着体外迁移、侵袭及体内转移能力增强。杂交瘤细胞CD133表达上调，过表达OCT4、Nanog、BMI1、Notch1、ALDH1及Sox2等干性调控转录因子，且体外克隆形成能力及体内成瘤能力增强。本项目研究证实，肺癌细胞通过与骨髓来源MSC自发融合可产生同时具备EMT特性及干细胞特性的杂交瘤细胞，从而促进肺癌转移。本研究为阐明炎症与肿瘤进展之间的关系以及肿瘤转移机制提供了新的线索。