基于含反药组合的经典名方海藻玉壶汤治疗甲状腺肿大大鼠探讨海藻不同品种与甘草配伍的生物效应与机制

Seaweed and Liquorice compatibility belongs to the category of “Eighteen antagonisms” which is an part of the controversial prohibited combinations in traditional Chinese medicine. But our early results of 973 Program showed that, under the pathology conditions, Seaweed and Liquorice anti-drug combination in the classical prescription-Haizao Yuhu decoction did not exhibit the characteristic “toxicity increasing”. In ancient literature and Chinese Pharmacopoeia 2010 Edition, seaweed contains two different varieties- Sargassum pallidum（Turn.）C.Ag. and Sargassum fusiforme（Harv.）Setch. We wonder that weather it is related to the anti-relationship between seaweed and liquorice in “Eighteen antagonisms”. So our study plans to research the dose-efficiency-toxicity relationship showed by different species of seaweed and liquorice compatibility under the pathology conditions. We will discuss the biological effect mechanism of this compatibility on goiter in rats according to the hypothalamus-pituiary-thyroid axis,and discuss its liver and kidney destroyed mechanism according to related genes and protein expression of hepatic enzyme P450 and renal cell apoptosis. These studies can provide a scientific basis for rational and safe using of Seaweed and Liquorice anti-drug combination. What’s more, it can provide thinking and reference to future research on “Eighteen antagonisms” which contains many kinds of medicinal materials.

海藻与甘草配伍属于中药配伍禁忌中的“十八反”反药组合范畴。但课题组在前期国家973计划课题研究中发现，在病理条件下，经典名方海藻玉壶汤中海藻和甘草反药组合并不完全表现出增毒的“相反”特性。由于古代文献和2010版《中国药典》中收载的海藻均包含两个不同品种（海蒿子、羊栖菜），是否“十八反”中记载海藻和甘草相反与海藻的品种有关？基于此，本课题拟研究病理条件下，不同品种海藻与甘草配伍的量－毒－效关系。从对下丘脑-垂体-甲状腺轴的影响探讨不同品种海藻与甘草配伍对甲状腺肿大大鼠的效应机制；从肝药酶P450相关基因及蛋白表达和肾细胞凋亡的角度探讨不同品种海藻与甘草配伍对肝肾损伤机制，为海藻甘草反药组合的临床安全、合理使用提供科学依据，也为今后进一步研究“十八反”中含多种药材基原的反药组合提供科研思路与借鉴。

本项目在前期研究基础上，基于甲状腺肿大病理模型，选择有临床应用基础的经典名方海藻玉壶汤，探讨海藻不同品种（海蒿子、羊栖菜）与甘草在复方中配伍产生的“毒”或“效”作用，其与海藻品种、反药组合剂量及反药组合加减应用的关系，以及产生“毒”或“效”的可能机制。通过检测影响甲状腺激素代谢、甲状腺受体水平等指标从下丘脑-垂体-甲状腺轴的角度探讨不同品种海藻与甘草配伍对甲状腺肿大大鼠“效”的作用及机制，通过检测心肝肾功能及组织形态、肝药酶P450相关基因及肾脏细胞凋亡等指标探讨不同品种海藻与甘草配伍对甲状肿大大大鼠心肝肾“毒”的作用及机制。综合分析实验结果初步得到以下结论：①海藻不同品种与甘草在接近临床常用剂量（即2015版《中华人民共和国药典·一部》规定剂量的低限、高限和高限的2倍）条件下于海藻玉壶汤中应用时，各剂量组均表现出对甲状腺功能减退所致的甲状腺肿大有一定程度的纠正作用，以高限的2倍剂量组的恢复作用较明显。②在此基础上优选药效明显的2倍剂量组在海藻玉壶汤中进行海藻不同品种与甘草反药组合的拆方研究，结果显示全方组对甲状腺肿大的恢复作用及回调甲状腺激素水平的效果优于各拆方组，可能与下丘脑-垂体-甲状腺轴的调节作用有关。不同品种的海藻与甘草配伍，未显示出明显差异。高限2倍剂量条件下，含海蒿子的海藻玉壶汤对肝功能相关指标显示出明显的恢复作用，可能与抑制甲肿大鼠肝脏相关基因表达的增强有关。含羊栖菜的海藻玉壶汤组则表现出影响肝脏中白蛋白的合成、影响肾功能相关指标的作用。③进一步进行海藻不同品种与甘草高剂量（《中国药典》高限剂量的3、4、5倍）条件下配伍对甲状腺肿大大鼠的生物效应及机制探讨，结果显示各剂量组对降低甲状腺肿大鼠甲状腺系数、改善甲状腺增生组织形态有明显的效果，可能与回调血清TSH水平、促进甲状腺细胞凋亡等相关。海藻不同品种之间比较，羊栖菜改善效果优于海蒿子。5倍剂量条件下，含羊栖菜的给药组肝肾功能及氧化抗氧化系统受到影响，而含海蒿子的给药组未表现出此变化且增强了抗氧化能力；可见在特定剂量条件下不同品种海藻与甘草配伍于复方中应用，显示出了对肝肾功能影响的差异。此部分属于超额完成。因此，海藻甘草“反”与“不反”是特定条件下的配伍禁忌，本项目为临床海藻甘草反药组合的安全、合理使用提供科学依据，也为今后进一步研究“十八反”中含多种药材基原的反药组合提供了科研思路与借鉴。