VEGF介导肾小球内皮细胞通透性增高的机制及Rac1蛋白在其信号通路中的作用

高血糖引起的肾小球内VEGF升高可能是导致糖尿病肾病发生发展的重要原因VEGF是否通过破坏肾小球内皮细胞紧密连接导致其通透性增高，既而导致肾小球高滤过和蛋白尿，目前未见报道。Rac1是与细胞通透性紧密相关的小GTPase蛋白，根据文献和我们的前期工作我们认为VEGF通过激活Rac1蛋白，既而改变肾小球内皮细胞的紧密连接导致细胞的通透性增高。为验证此假设，拟用质粒转染、免疫沉淀、免疫印迹、免疫荧光和荧光共振能量转移等技术观察：1）VEGF刺激肾小球内皮细胞紧密连接导致其通透性增高的作用；2）VEGF对Rac1蛋白的激活作用以及后者在VEGF导致细胞通透性增高中的作用；3）Rac1蛋白在VEGF的PI3-K/AKT和PKC信号通路中的作用；4）阻断Ras1后上述VEGF作用的缺失。