基于人类全基因组编码蛋白高通量芯片筛选神经精神狼疮相关靶抗原及特异性自身抗体的研究

Neuropsychiatric Systemic Lupus Erythematosus(NPSLE) is a vital complication of lupus, with high morbidity(14%-75%) and poor prognosis. The pathogenesis of NPSLE remains unclear, and the diagnosis of NPSLE is mainly based on clinical manifestation, laboratory examination of cerebrospinal fluid, neuroimaging and neurophysiological examination. The absence of sensitive and specific biomarkers often make NPSLE diagnosis difficult. In this study, we use protein microarrays( about 17000 of dots, all of the proteins expressed by open reading frame in human), to explore the autoantibody profiles of both serum and cerebrospinal fluid in patients with NPSLE, lupus without NPSLE and healthy controls. The autoantibodies of NPSLE are screened by comparing the profile of NPSLE, lupus without NPSLE and healthy controls. The candidate biomarkers are further validated in an independent cohort by cutomized microarrays, ELISA and Wetern Blotting. The corelation of biomarkers and clinical phenotype are analyzed too. The target of the study is to find the candidate autoantibodies for diagnosis and prognosis prediction of NPSLE, as well as to explore the pathogenesis of NPSLE.

神经精神狼疮（NPSLE）是SLE患者的重要并发症，发病率高（14-75%），病情凶险。目前NPSLE发病机制未明，诊断主要依赖临床表现、脑脊液检查、影像学检查和神经检查综合判断，缺乏敏感特异的生物标志物，不利于早期诊断和早期治疗。本研究拟使用包含人类所有基因开放阅读框架表达蛋白（17000蛋白点）高通量芯片，系统研究NPSLE患者、非NPSLE的SLE患者及健康对照者的血清和脑脊液自身抗体谱；通过比较三者的自身抗体谱，探索NPSLE特异性自身抗体；对于候选NPSLE特异性抗体，在大样本中使用小芯片法、酶联免疫吸附法和免疫印迹法进一步验证敏感性和特异性；并结合临床表型，分析其临床意义。本研究预期发现NPSLE特异性自身抗体，有潜力应用于NPSLE早期诊断、临床分型及预测预后。并有助于探索NPSLE的发病机制。

神经精神狼疮(Neuropsychiatric Systemic Lupus Erythematosus，NPSLE) 是系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus，SLE)的重要并发症，发病率高，病情凶险。NPSLE发病机制未明，诊断主要依赖临床表现、脑脊液检查、影像学检查和神经检查综合判断，不利于早期诊断和早期治疗，亟需新型生物标志物辅助诊断。.针对该关键问题，本课题采用含有17,000个蛋白的人类全基因组蛋白表达高通量芯片，系统性比较NPSLE、非NPSLE对照和健康对照的脑脊液和血清自身抗体谱差异，筛选NPSLE候选自身抗体标志物；进一步构建定制蛋白芯片，在大规模独立样本中验证NPSLE血清和脑脊液自身抗体标志物；并对相应自身抗原的生物功能进行生物信息学分析，探讨新型自身抗体标志物对NPSLE的诊断价值，以及自身抗原在NPSLE发病中的作用。.研究发现，运用人类全基因组蛋白高通量芯片分别筛选出27个和15个NPSLE相关血清和脑脊液候选标志物。在大规模独立样本验证中，证实脑脊液抗SS-A抗体、抗TROVE2抗体和抗H3抗体是NPSLE的生物标志物，与神经系统表现密切相关；SLE组血清抗RPLP1、抗RPLP2、抗NOL4和抗S100A11抗体阳性率高于对照组，新发现的抗NOL4抗体对诊断SLE的敏感性和特异性为15.91%和93.11%，NPSLE组与非NPSLE组自身抗体谱无显著差别。功能分析发现，137种NPSLE脑脊液识别的特有自身抗原主要聚类于神经系统，提示与NPSLE发病密切相关；22种NPSLE与非NPSLE脑脊液共同识别的自身抗原主要聚类于炎症反应，提示炎症是SLE的重要发病机制。.本研究发现的脑脊液抗SS-A抗体对诊断NPSLE具有一定价值，有望应用于NPSLE的早期诊断。本研究表明，全基因组蛋白芯片技术筛选自身抗原可为探索NPSLE和SLE的发病机制提供新线索。