仿生自由基化学发光毛细管电泳及抗氧化活性成分筛选研究

模拟生物体糖尿病时的富糖状态，建立稳定的糖基化反应，并以此为仿生自由基源，建立一种仿生自由基化学发光毛细管电泳联用分析方法及复杂体系抗氧化活性组分筛选方法。采用高效毛细管电泳分离，辅以紫外、化学发光串联双检测装置，通过化学发光谱峰和紫外谱峰的互相对照，结合测量获得的抗氧化组分清除自由基的半数清除浓度IC50值，研究成为复杂体系中抗氧化活性组分的筛选方法。并应用于5-8种抗糖尿病的中药材的抗氧化活性组分筛选，从中寻找具有强的清除自由基能力的活性组分，使之成为筛选基于抗氧化作用的抗糖尿病药物的有效手段。.研究中拟以醛糖与氨基酸、蛋白质等氨基化合物的糖基化反应为氧自由基源，Luminol为发光试剂，基于抗氧化活性组分清除或部分清除氧自由基从而使得Luminol发光减弱的原理，通过测量抗氧化剂清除自由基的IC50值对抗氧化活性进行筛选和评价。

项目研究模拟生物体糖尿病时的富糖状态，建立了稳定的糖基化反应体系，并以此为仿生自由基原，建立了一种仿生自由基化学发光毛细管电泳联用分析方法及复杂体系抗氧化活性组分筛选方法。以果糖为重点研究对象，在优化的条件下，8.0 mmol/L的果糖可产生羟自由基量为19.27 μmol/L，并以此仿生自由基体系，初步评价了小檗碱和麻黄碱的抗氧化能力。并评价了十种抗氧化剂的抗氧化能力，研究了化合物结构与抗氧化能力的关联性。. 分别自组装了CE-CL装置和CE-UV-CL双检测装置，对槐米提取物的抗氧化活性成分进行了筛选，达到了项目的预期结果。采用建立的CE-CL装置，分别测定了市售喹诺酮类药物加替沙星片、甲磺酸帕珠沙星粉针中目标组分的含量、中药材苦参中氧化苦参碱的含量、珍菊降压片中芦丁的含量、贝诺酯在兔血中代谢物扑热息痛含量的测定。. 出于糖基化重要产物甲醛无紫外吸收，建立了HPLC法评价基于果糖自氧化的抗氧化评价方法，研究了盐酸小檗碱和阿魏酸的抗氧化能力。.采用常规化学发光和FI-CL法研究了几种天然产物提取物的抗氧化能力，分别采用了DPPH•、•OH（Fenton体系）、•O2—（邻苯三酚自氧化体系）、FRAP法、单线态氧（1O2）等法。. 针对研究中出现的异常现象，研究了Trolox和Vc的自氧化现象。发现维生素C与Trolox的抗氧化性质异常，二者均表现为高浓度是有抗氧化性，低浓度时有自氧化趋势。但是当二者和起来连用时发现两者的具有协同的抗氧化性。. 通过项目的开展，基本达到了预期效果，建立了仿生自由基化学发光毛细管电泳联系分析方法，并成功用于一些复杂体系的抗氧化活性组分的筛选和评价。.