miR-30d调控K-ras影响肺腺癌微环境中Treg细胞分化的机制研究

Treg细胞介导的免疫抑制是肿瘤免疫逃逸的关键机制，但肿瘤微环境中调控Treg细胞分化的机制不明。我们前期已证实Treg细胞在肺腺癌患者外周血及肺腺癌引起的恶性胸腔积液中明显增多，提示肺腺癌微环境中存在可诱导Treg细胞增多的关键分子。进一步研究发现在肺腺癌患者的初始T细胞中miR-30d表达明显升高，而K-ras表达降低，且改变miR-30d或K-ras的表达均影响Treg细胞的水平。故推测，在肺腺癌微环境中，miR-30d可能通过干扰K-ras的表达促进初始T细胞向Treg细胞分化，从而增加Treg细胞，促进肿瘤的免疫逃逸。本课题拟采用干扰和过表达技术通过体外细胞和活体动物模型，确认miR-30d、K-ras和Treg细胞之间的相互作用关系，揭示miR-30d调控K-ras影响Treg细胞分化的分子机制，为肿瘤的治疗提供新策略。

Treg 细胞介导的免疫抑制是肿瘤免疫逃逸的关键机制，但肿瘤微环境中调控Treg 细胞分化的机制不明。我们前期已证实 Treg 细胞在肺腺癌患者外周血及肺腺癌引起的恶性胸腔积液中明显增多，提示肺腺癌恶性胸腔积液微环境中存在可诱导 Treg 细胞增多的关键分子。本项目正鉴于此，重点探讨了miRNA对Treg细胞分化和趋化作用的调控机制。首先，本研究在196例肺癌患者恶性胸腔积液中检测了miRNA表达水平。通过基因芯片筛选和验证，发现5种miRNA联合检测可有效预测肺腺癌合并胸腔积液患者的生存期，且利用miRNA 表达模式得出的风险评分，可以作为肺癌胸腔积液患者预后的独立预测因子。相关性分析发现miR-30d与Treg细胞的水平呈显著正相关，而miR-141与Treg细胞的水平呈显著负相关。. 进一步，我们利用肺癌动物模型和体外细胞分化实验均证实miR-30d可以诱导naïve T细胞向Treg细胞分化，并发现miR-30d可以通过增加Treg细胞的水平加重肺癌进程。通过Luciferance实验证实K-ras是miR-30d的靶基因，miR-30d可通过抑制K-ras基因的表达，调控naïve T细胞向Treg细胞的分化。最后，我们额外研究了miR-141 在肿瘤微环境调控Treg细胞的作用。发现miR-141 可以通过靶向CXCL1趋化Treg细胞至肿瘤微环境，进一步参与肿瘤的免疫逃逸。. 本项目的完成，阐明了Treg细胞在肿瘤微环境中增多的机制，为肿瘤的免疫治疗提供新靶点和新策略。本课题以肺腺癌及其引起的恶性胸腔积液为研究对象，这对于肿瘤患者，尤其是失去手术机会的晚期患者提供了新的研究方法和治疗思路，在恶性肿瘤的生物治疗中有着广泛的应用前景。项目申请人以第一作者或通讯作者发表了 SCI 论文 9 篇，培养博士生 3 名，硕士生 1 名。