基于cajal细胞NO-cGMP信号通路探讨红藤清肠方治疗炎症性肠病中的作用机制

The main pathogenesis of inflammatory bowel disease (IBD) in traditional Chinese medicine is " Retention of damp-heat, stagnation of QI-blood and yang deficiency of spleen and kidney ". According to the pathogenesis, we create the Hongteng Qingchang recipe,which has been shown to have clinical efficacy in the treatment of IBD. At present, in the study of pathogenesis of IBD, we pay more attention to the immune, inflammatory factors and so on, and seldom focus on intestinal motility. Interstitial cells of cajal(ICC) are the pacemaker cells of intestinal motility. Previous research has confirmed that ICC regulated intestinal motility by NO-cGMP signal pathway, and recent research has found that, morphology and function of ICC are changed in patients with IBD, but the mechanism in the pathogenesis of IBD has not been reported. This project is using the mouse model of IBD established by the Morris method with the intervention of Hongteng-Qingchang recipe and inhibitors of NO-cGMP signal pathway, to analyse the mechanism of cajal cells in inflammatory bowel disease from the whole, cell, gene, protein levels by confocal laser scanning microscope, cell biology, molecular biology methods, and discuss the mechanism of Hongteng-Qingchang recipe in the treatment of IBD from the perspective ICC, to provide a theoretical basis for the clinical application of TCM.

中医认为"湿热蕴结，气血壅滞，脾肾阳虚"是炎症性肠病（IBD）的主要病机，基于此创立的红藤清肠方已经临床研究证实有效。目前IBD病机研究多集中于免疫、炎症因子等方面，对其肠动力异常研究较少。近期研究发现，在IBD患者中cajal细胞形态功能均发生改变，但在IBD发病中的作用机制研究尚未见报道。Cajal细胞是肠道动力的起搏细胞，前期研究已证实，cajal细胞可介导NO-cGMP信号通路调控肠道动力活动。本项目以国际公认的Morris方法建立IBD模型小鼠，予红藤清肠方治疗，并通过NO-cGMP信号通路上下游抑制剂进行干预，运用细胞生物学、激光共聚焦显微镜、分子生物学等方法，整体、细胞、基因、蛋白多层面分析cajal细胞与NO-cGMP信号通路在IBD中的作用机理及红藤清肠方的干预作用，从cajal细胞角度探讨红藤清肠方介导NO-cGMP信号通路治疗IBD的作用机制，为中药应用提供理论依据。

炎症性肠病的发病率逐年上升，且迁延难愈，多发于青壮年，严重威胁着患者的健康和生命。炎症性肠病病机不明，目前IBD病机研究多集中于免疫、炎症因子等方面，对其肠动力异常研究较少。Cajal细胞是肠道动力的起搏细胞，前期研究已证实，cajal细胞可介导NO-cGMP信号通路调控肠道动力活动。本项目以TNBS灌肠建立IBD动物模型，予多年临床经验总结且疗效可靠的红藤清肠方治疗，并通过NO-cGMP信号通路上下游抑制剂进行干预，运用细胞生物学、激光共聚焦显微镜、分子生物学等方法，多层面分析cajal细胞与NO-cGMP信号通路在IBD中的作用机理及红藤清肠方的干预作用，通过本研究发现在IBD动物模型中，ICC数量减少，超微结构异常，NO表达增高，主要为iNOS上调，nNOS表达降低，iNOS的上调促进炎症的发生发展，也促进ICC的损伤进一步发生，通过本研究基本明确ICC可通过NO-cGMP信号通路影响IBD的发病进程，促进肠道炎症反应及引起动力异常；红藤清肠方干预后的IBD模型，上调的iNOS可得以改善，并且在红藤清肠方药物血清干预的ICC细胞中，其功能明显优于模型血清组，故红藤清肠方可能通过NO-cGMP信号通路保护或者恢复ICC功能从而发挥治疗IBD的作用。本项目培养博士研究生2名。国内主要研究人员参加国内外学术交流7次；已发表和接收论文3篇，SCI论文投稿待刊2篇。