探讨化浊祛湿方通过“PPARα-ApoCIII-TRLs”通路改善高甘油三酯血症预防动脉粥样硬化的作用机制

Modern studies proof that elevated plasma TG level is an independent risk factor for AS after lowering LDLC. Fibrates may cause hepar or renal function damage and treating hyperlipidemia patients with atorvastatin and fibrates can lead to severe rhabdomyolysis and lack of effective treatment plan. Research group pre-clinical studies confirmed that Huazhuo-qushi prescription effectively reduces HTG, improve AS. Experimental studies proved that regulation of serum lipid metabolism may be due to activating the expression of PPARα, and increasing TG decomposition. PPARαregulates expression of ApoCIII to inhibit of TRLs uptake. TRLs can regulate ATF3 pathway leading to AS. Hereby, we propose the hypothesis that Huazhuo-qushi prescription effectively reduces HTG and improve AS because of the pathway of PPARα/ApoＣⅢ/TRLs/MAPK/JNK/ATF3. To prove this hypothesis, this study will use LPL knockout mice to produce high TG-atherosclerosis models testing from the aspects of blood biochemistry, histopathology, ultrastructure, gene level,enzyme activity, and so on. In vitro experiments testing will be carried out from the aspects of cell model construction, immunohistochemistry, factor detection, gene silencing technology, and so on. Using these methods to study the mechanism of action on Huazhuo-qushi prescription reducing HTG and improving AS by "PPARα-ApoCIII-TRLs" pathway.

现代研究证明，降低低密度脂蛋白胆固醇后，高甘油三酯血症（HTG）仍然是动脉粥样硬化（AS）的独立危险因素。降TG贝特类药物存在肝肾损害及与他汀类药物联合应用导致肌溶解的副作用。课题组前期临床证实：化浊祛湿方能有效降低TG、改善AS；前期实验证明其调节血脂的作用是通过激活PPARα增加TG分解实现的。TG代谢与PPARα调节ApoCIII-TRLs通路有关，TRLs可调控ATF3基因表达致AS。据此提出假说，此方降低TG改善AS是通过PPARα/ApoCIII/TRLs调控MAPK/JNK/ATF3炎症通路实现的。为证明此假说，本研究在体实验利用LPL基因敲除小鼠制造高TG的动脉粥样硬化模型，分别从生化、组织病理、超微结构、基因、酶活性等水平，体外实验从细胞模型的构建、免疫组化、因子检测，基因沉默等方面，探讨化浊祛湿方通过PPARα-ApoCIII-TRLs改善HTG预防AS的作用机制。

现代研究证明，降低低密度脂蛋白胆固醇后，高甘油三酯血症（HTG）仍然是动脉粥样硬化（AS）的独立危险因素。降TG贝特类药物存在肝肾损害及与他汀类药物联合应用导致肌溶解的副作用。课题组前期临床证实：化浊祛湿方能有效降低TG、改善AS；前期实验证明其调节血脂的作用是通过激活PPARα增加TG分解实现的。TG代谢与PPARα调节ApoCIII-TRLs通路有关，TRLs可调控ATF3基因表达致AS。据此提出假说，此方降低TG改善AS是通过PPARα/ApoCIII/TRLs调控MAPK/JNK/ATF3炎症通路实现的。为证明此假说，本研究在体实验利用LDL基因敲除仓鼠制造高TG的动脉粥样硬化模型，分别从生化、组织病理、基因、酶活性等水平，体外实验从细胞模型的构建、免疫组化、炎症因子检测、基因沉默过表达等方面，探讨化浊祛湿方通过PPARα-ApoCIII-TRLs改善HTG预防AS的作用机制。经研究得到如下结论：1.采用高脂饲料喂养LDL-/- 金黄仓鼠具有血清 TG 水平显著性升高及肝组织病理学改变；2.化浊祛湿方可以降低高脂血症仓鼠血清甘油三酯水平，改善肝组织病理结构；3.化浊祛湿方在调节血脂代谢的同时并不引起肝肾功能的损害，无肝肾毒性；4.化浊祛湿方含药血清可降低泡沫细胞内甘油三酯含量，提高细胞内脂质代谢；5.化浊祛湿方含药血清对细胞无明显毒性，且具有减轻凋亡的作用；6.化浊祛湿方可能是通过增加 PPARα、降低ApoCⅢ表达，使TG的分解增加，从而发挥调节脂代谢的作用，因此推测PPARα、ApoCⅢ可能是化浊祛湿方调节TG代谢紊乱的有效作用靶点；7.化浊祛湿方可减少血清炎症因子、粘附分子的分泌，降低炎症和粘附作用可能是其预防动脉斑块形成作用之一；8.化浊祛湿方可有效减少主动脉脂质沉积，调节血管内Ⅰ/Ⅲ型胶原比例，是预防动脉粥样硬化形成的作用之一；9.路志正教授用调理脾胃祛湿化浊法，针对痰湿中阻、运化失常等内伤脾胃病理机制，加强脾胃运化，从源头防控，降低甘油三酯、减轻炎症、粘附反应，从而实现抗动脉粥样硬化的作用，是中医既病防变、治未病学术思想的具体体现，为降低高甘油三酯血症并预防动脉粥样硬化提供新的治疗思路。