CD8+ T细胞的活化,分化,杀伤和迁移功能的分子机制

CD8+ T细胞在清除肿瘤及病原微生物的感染中起重要作用。静息期的CD8+ T细胞经T细胞受体识别抗原或多肽后，启动一系列细胞内的信号，导致CD8+ T细胞活化，增殖并分化成具有杀伤能力的CD8+ CTLs。其中，粘附分子整合素（Integrins）与CD8+ T细胞的活化，杀伤和迁移功能密切相关。已证实信号蛋白SLP-76，ADAP， SKAP55，RapL和Kindlin能介导整合素分子和T细胞的活化。但是，目前仍不清楚它们在调控CD8+ T细胞各项功能中的作用。我们将利用TCR转基因小鼠结合靶基因敲除小鼠或慢病毒转染系统在体内外检测上述信号分子如何与上下游信号蛋白和激酶联合作用，调控CD8+ T淋巴细胞的活化，分化，杀伤和迁移能力。我们将进一步利用双光子显微镜等探讨渗透到活体肿瘤组织内的CD8+ CTLs如何与肿瘤细胞相互作用，抑制哪些信号通路，导致肿瘤逃脱免疫监视。

CD8+ 细胞毒性T细胞（CTL）在清除肿瘤过程中起重要作用。肿瘤细胞通过高表达的PDL-1（程序性死亡受体配体1），与CTL表面的抑制性分子PD-1（程序性死亡受体-1）结合，抑制CTL抗肿瘤反应。大量的研究表明，封闭PD-1/PDL-1增强抗肿瘤反应，但仍然不清楚在DC免疫治疗肿瘤的过程中，何种信号蛋白调控PD-1的表达和CTL的杀伤功能。我们利用小鼠肿瘤模型研究发现，呈递低剂量多肽的DC疫苗降低CTL中的PD-1表达、Fyn磷酸化，增强抗肿瘤效应。更重要的是，Fyn结合并被磷酸化信号蛋白SKAP55和ADAP，阳性调控PD1表达，进而抑制CTLs的效应功能。相应的信号传导机制主要是通过依赖钙信号的方式，SKAP55和ADAP活化NFATc1，启动PD1的表达。经DC疫苗免疫后，缺失SKAP55和ADAP的小鼠显著下调浸润到肺内肿瘤中CD8+ CTL表面PD-1 的表达，进而显著增强机体经DC疫苗介导的抗肿瘤效果。