E2F6与miR-19a/b反馈通路在扩张性心肌病病理基质维持中的机制研究

Dilated cardiomyopathy (Dilated Cardiomyopathy, DCM) is the most common type of primary cardiomyopathy with very poor prognosis. Our previous research found that miR-19a/b was downregulated in DCM patients plasm and PTEN,CTGF and TSP-1 might be its target genes.We also found that E2F6 was upregulated in DCM tissue which might repress miR-19a/b expression. Moreover, TFDP2 which was the direct target genes of miR-19a/b could enhance E2F6 function. So we present the hypothesis that the downregulation of miR-19a/b causing the upregulation of the target genes PTEN,CTGF and TSP-1 which could induce cardiac myocyte apoptosis and interstitial fibrosis to maintain DCM pathological matrix and there was a feedback path between E2F6 and miR-19a/b. The specific interpretation was that E2F6 inhibition of miR-19a/b raised its target gene TFDP2,which could enhance the activity of E2F6. We will elucidate our hypothesis in clinical samples,the rat model and multiple heart cells to provide valuable basic information for the treatment of DCM by use of siRNA interference,miRNA in vitro and in vivo transfection,transcription factor regulation detection,etc.

扩张性心肌病(Dilated Cardiomyopathy，DCM)是原发性心肌病中最常见的一种，预后极差。课题组前期研究发现miR-19a/b在DCM患者血浆中显著下调，且PTEN、CTGF和TSP-1均可能是其靶基因，同时发现E2F6在DCM中上调，可能抑制miR-19a/b表达，且miR-19a/b靶基因TFDP2可能增强E2F6活性，由此，课题组提出假说：miR-19a/b在DCM中低表达可能通过靶向调控PTEN、CTGF和TSP-1促进心肌细胞凋亡及间质纤维化且E2F6与miR-19a/b之间可形成反馈通路：E2F6抑制miR-19a/b- - miR-19a/b低表达靶向上调TFDP2- - TFDP2增强E2F6活性。本课题拟从临床样本，大鼠模型，细胞分子研究三个层面，运用siRNA干扰，miRNA体内外转染，转录因子调控等实验手段，阐明该反馈通路在DCM病理基质维持中的作用机制。

MicroRNAs（miRNAs）作为非编码RNA的重要类型，通过转录后调控机制广泛参与了各项生命活动过程，如：生物进化与发育，细胞分化与恶变，细胞增殖与凋亡等。由于具有生物保守性和特异性，miRNAs还被广泛用于心血管疾病的发病机制、诊断及疗效评估的研究。. 慢性心力衰竭（CHF）是各种心脏疾病的严重阶段，心脏间质纤维化导致心室重构是多种病因致心衰的共同病理表现。课题组发现miR-19a/b在心衰患者血浆中呈显著低表达，TGF-β R Ⅱ为其靶基因，而TGF-β1可诱导心脏成纤维细胞自噬和纤维化，且细胞自噬与纤维化成正相关，因此，miR-19a/b可通过靶向结合TGF-β R II，调控TGF-β1信号通路，抑制人心脏成纤维细胞的自噬以及自噬介导的纤维化。. 右心在相关疾病的发生、发展及预后中发挥着重要的作用，多种心肺疾病均可导致右心衰竭。肺栓塞（PE）是急性右心衰的主要病因之一，由于缺乏特异的临床表现和实验室检查，临床上容易被误诊或漏诊，病残率和病死率均较高。课题组针对PE血浆miRNA进行高通量检测，发现高表达的miR-28-3p与肺栓塞发生密切相关，进一步建立肺栓塞Beagle犬模型对结果进行验证，发现miR-28-3p有作为辅助诊断肺栓塞的生物标志物的潜力。. 同时，课题组针对心力衰竭的另一主要原因——急性心肌梗死（AMI），通过球囊血管成形术阻断左前降支成功建立猪AMI模型，发现左前降支的阻塞位置可能与恶性心律失常的发生有关。在此基础上，课题组建立猪AMI血再灌注模型，发现缺血再灌注后肾小管损伤生物标志物（NGAL，IL-18和L-FABP）迅速升高，可反映亚临床急性肾损伤，并对缺血再灌注后有效肾脏保护干预时机的选择具有潜在价值。. 总之，课题组这些研究将为揭示心血管疾病，尤其是心力衰竭多方面的机制打下基础，并为将来进一步可能服务于临床上提供依据。